Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей
и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств фипронила
и его метаболита фипронил-сульфона
в продуктах яичных сухих пищевых, яйцах, мясе
и субпродуктах птицы методом капиллярной
газожидкостной хроматографии

Методические указания
МУК 4.1.3489/1-17

Москва 2018

1. Разработаны сотрудниками ФБУН «Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана» Роспотребнадзора (В.Н. Ракитский, Н.Е. Федорова, М.В. Ларькина, С.К. Рогачева, Д.Н. Соболев, В.В. Баюшева).

2. Свидетельство об аттестации МИ № РОСС RU.0001.310430/0026.09.10.17.

3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 5 октября 2017 г.

4. Введены впервые.

СОДЕРЖАНИЕ

 

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств фипронила и
его метаболита фипронил-сульфона в продуктах
яичных сухих пищевых, яйцах, мясе и
субпродуктах птицы методом капиллярной
газожидкостной хроматографии

Область применения

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода газовой хроматографии с масс-селективным (МСД) и электронозахватным (ДЭЗ) детекторами для определения в продуктах яичных сухих пищевых, яйцах, мясе и субпродуктах птицы массовой концентрации фипронила и его метаболита фипронил-сульфона в диапазонах 0,002 - 0,05 мг/кг (МСД) и 0,005 - 0,05 мг/кг (ДЭЗ).

Методические указания носят рекомендательный характер.

Фипронил

(±)-5-амино-1-(2,6-дихлор-α,α,α-трифтор-n-толил)-4-трифторметилсульфинил-пиразол-3-карбонитрил (ИЮПАК)

C₁₂H₄Cl₂F₆N₄OS

Молекулярная масса: 437,2.

Фипронил представляет собой бесцветный кристаллический порошок с запахом плесени. Температура плавления: 203 °С. Давление паров: 3,7·10^-4 МПа (при 25 °С). Удельная плотность: 1,71 г/см³. Коэффициент распределения в системе н-октанол/вода: K_owlogP = 3,75 (при pH 7 и 20 °С). Растворимость в воде (мг/дм³, 20 °С): 3,78. Растворимость в органических растворителях (мг/дм³, 20 °С): ацетон - 545900; метанол - 137500; толуол - 3000; гексан - 28. Не устойчив к фотолизу: DT₅₀ - 0,33 дня.

Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность (LD₅₀) для крыс - 92 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD₅₀) для кроликов - 354 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LC₅₀) для крыс - 0,36 мг/дм³ воздуха.

Основным продуктом метаболитической деградации (окисление) фипронила в воде, растениях и почве является фипронил-сульфон.

Фипронил-сульфон (МВ46136)

(±)-5-амино-1-(2,6-дихлор-α,α,α-трифтор-n-толил)-4-трифторметилсульфонил-пиразол-3-карбонитрил (ИЮПАК)

Область применения. Фипронил - инсектицид широкого спектра действия - контактный и кишечный яд. Имеет умеренные системные свойства и высокую остаточную активность при обрабатывании листьев, может применяться для обработки и протравливания семян. Блокирует рецепторы насекомых и членистоногих, нарушает передачу нервных импульсов, что приводит к параличу и гибели паразитов.

C₁₂H₄Cl₂F₆N₄O₂S

Молекулярная масса: 453,2

1. Погрешность измерений

При соблюдении всех регламентируемых условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерения при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 и 2 для соответствующих диапазонов концентраций.

Таблица 1

Значения характеристики погрешности, нормативов оперативного
контроля точности, повторяемости, воспроизводимости (МСД)

Таблица 2

Значения характеристики погрешности, нормативов оперативного
контроля точности, повторяемости, воспроизводимости (ДЭЗ)

Полнота извлечения веществ, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (n = 20) приведены в табл. 3 (МСД) и 4 (ДЭЗ).

Таблица 3

Полнота извлечения веществ, стандартное отклонение,
доверительный интервал среднего результата (МСД)

Таблица 4

Полнота извлечения веществ, стандартное отклонение,
доверительный интервал среднего результата (ДЭЗ)

2. Метод измерений

Метод основан на определении фипронила и фипронил-сульфона с помощью капиллярной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с масс-селективным детектором (МСД) и детектором электронного захвата ионов (ДЭЗ).

Метод включает два способа пробоподготовки.

Согласно первому способу экстракцию веществ из анализируемых проб выполняют ацетонитрилом, содержащим 1 % уксусной кислоты, с использованием смеси солей для экстракции (смесь сульфата магния и хлорида натрия), очистку экстрактов проводят методом дисперсионной твердофазной экстракции с применением смеси сорбентов на основе амина, октадецилсилана и графитизированной сажи.

По второму способу экстракцию веществ из анализируемых проб выполняют 30 %-м ацетоном в ацетонитриле, пробы вымораживают, фильтруют и очищают аликвоту экстракта на колонке, содержащей силикагель и флорисил.

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства,
реактивы и материалы

3.1. Средства измерений

Примечание. Допускается использование других средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующей дополнительной очистки растворителей.

3.3. Вспомогательные средства измерений,
устройства, материалы

Примечание. Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на газовые хроматографы.

4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-15. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и ГН 2.2.5.2308-07. Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.

4.3. При работе с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 МПа (150 кгс/см²), необходимо соблюдать федеральные нормы и правила в области промышленной безопасности «Правила промышленной безопасности опасных производственных объектов, на которых используется оборудование, работающее под избыточным давлением» (утв. приказом Ростехнадзора от 25.03.2014 № 116). Запрещается открывать вентиль баллона, не установив на нем понижающий редуктор.

5. Требования к квалификации операторов

Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы методом капиллярной газожидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 13.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %;

- выполнение измерений на газовых хроматографах проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление растворов, градуировочных растворов, раствора внесения, установление градуировочных характеристик, подготовка смеси солей и сорбентов, подготовка колонки, проверка поведения веществ на ней.

7.1. Очистка органических растворителей

7.1.1. Ацетон

Ацетон перегоняют над небольшим количеством перманганата калия и прокаленным карбонатом калия или подвергают ректификационной перегонке на колонке с числом теоретических тарелок не менее 30.

7.1.2. Ацетонитрил

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 дм³ ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 ч, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм³ ацетонитрила 10 г карбоната калия).

7.2. Приготовление раствора уксусной кислоты в ацетонитриле
с объемной долей 1 % (1 %-й раствор)

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 300 - 400 см³ ацетонитрила, вносят 10 см³ ледяной уксусной кислоты, перемешивают, доводят ацетонитрилом до метки, вновь перемешивают. Раствор хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.

7.3. Приготовление раствора ацетона в ацетонитриле
с объемной долей 30 % (30 %-й раствор)

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 300 - 400 см³ ацетонитрила, вносят 300 см³ ацетона, перемешивают, доводят ацетонитрилом до метки, вновь перемешивают. Раствор хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.

7.4. Приготовление градуировочных растворов и раствора внесения

7.4.1. Исходный раствор фипронила для градуировки
(концентрация 100 мкг/см³)

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают (0,01 ± 0,0001) г фипронила, растворяют в 50 - 70 см³ ацетона, доводят ацетоном до метки, тщательно перемешивают. Раствор хранят в холодильнике при температуре (4 ± 2) °С в течение 6 месяцев.

7.4.2. Исходный раствор фипронил-сульфона для градуировки
(концентрация 100 мкг/см³)

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают (0,01 ± 0,0001) г фипронил-сульфона, растворяют в 50 - 70 см³ ацетона, доводят ацетоном до метки, тщательно перемешивают. Раствор хранят в холодильнике при температуре (4 ± 2) °С в течение 6 месяцев.

7.4.3. Рабочий раствор № 1 фипронила и фипронил-сульфона для градуировки
и внесения (концентрация 1 мкг/см³)

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают по 1,0 см³ исходных градуировочных растворов фипронила и фипронил-сульфона с концентрациями 100,0 мкг/см³ (п. 7.4.1 и 7.4.2), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 1 с концентрациями фипронила и фипронил-сульфона по 1,0 мкг/см³.

Раствор хранят в холодильнике при температуре 4 - 6 °С в течение месяца.

Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения веществ методом «внесено-найдено», а также контроле качества результатов измерений методом «добавок».

7.4.4. Серия № 1 (МСД). Рабочие растворы № 2 - 6 фипронила и
фипронил-сульфона для градуировки
(концентрации 0,002 - 0,05 мкг/см³)

В 5 мерных колб вместимостью 100 см³ помещают по 0,2; 0,5; 1,0; 2,0 и 5,0 см³ градуировочного раствора № 1 с концентрацией 1,0 мкг/см³ (п. 7.4.3), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 2 - 6 с концентрацией фипронила и фипронил-сульфона 0,002; 0,005; 0,01; 0,02 и 0,05 мкг/см³ соответственно.

Растворы хранятся в холодильнике (4 ± 2) °С в течение одной недели.

7.4.5. Серия № 2 (ДЭЗ). Рабочие растворы № 2′ - 6′ фипронила и
фипронил-сульфона для градуировки
(концентрации 0,005 - 0,05 мкг/см³)

В 5 мерных колб вместимостью 100 см³ помещают по 0,5; 1,0; 2,0; 2,5 и 5,0 см³ градуировочного раствора № 1 с концентрацией 1,0 мкг/см³ (п. 7.4.3), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 2′ - 6′ с концентрацией фипронила и фипронил-сульфона 0,005; 0,01; 0,02; 0,025 и 0,05 мкг/см³ соответственно.

Растворы хранятся в холодильнике при температуре (4 ± 2) °С в течение одной недели.

7.5. Приготовление смеси солей для экстракции

Для приготовления одного набора смеси солей для экстракции смешивают (4 ± 0,01) г магния сернокислого и (1 ± 0,01) г натрия хлористого, до использования хранят в герметичной упаковке (не более 6 месяцев).

Примечание. Возможно использование коммерческих наборов солей QuEChERS для экстракции проб фруктов и овощей массой 10 г.

7.6. Приготовление смеси сорбентов для очистки экстрактов

Для приготовления одного набора смеси сорбентов для очистки экстрактов в центрифужную полипропиленовую пробирку вместимостью 2 см³ помещают (50 ± 4) мг сорбента для твердофазной экстракции на основе первичного-вторичного амина, (50 ± 4) мг графитизированной сажи, (150 ± 4) мг магния сернокислого и (50 ± 4) мг твердофазного сорбента на основе октадецилсилана, закрывают герметично крышкой, встряхивают для перемешивания, хранят не более 6 месяцев.

Примечание. Возможно использование коммерческих дисперсионных наборов QuEChERS для фруктов и овощей с маслом и пигментами, помещенных в полипропиленовые пробирки вместимостью 2 см³.

7.7. Подготовка колонки для очистки экстракта

Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см, внутренним диаметром 10 - 12 мм уплотняют тампоном из стекловаты, засыпают 2 г флорисила, 2 г силикагеля и 6 г безводного сульфата натрия, легко утрамбовывая каждый слой. Колонку промывают последовательно 25 см³ ацетона и 25 см³ ацетонитрила. Скорость прохождения растворителя 1 - 2 капли в секунду. Не допускать высыхания верхнего слоя! Колонка готова к работе.

7.8. Проверка хроматографического поведения фипронила и
фипронил-сульфона на колонке

В круглодонную колбу вместимостью 25 см³ помещают 1,0 см³ градуировочного раствора № 6′ с концентрацией фипронила и фипронил-сульфона 0,05 мкг/см³ (п. 7.4.5), упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре водяной бани не выше 35 - 40 °С. Остаток растворяют в 3,0 см³ ацетонитрила, помещая на ультразвуковую баню на 30 с. Полученную пробу наносят на колонку, подготовленную по п. 7.8.

Колбу обмывают дважды ацетонитрилом, порциями по 3 см³, которые также наносят на колонку. Скорость прохождения растворителя через колонку - 1 - 2 капли в секунду. Элюат отбрасывают. Вещества элюируют 75 см³ ацетонитрила, собирая 5 порций элюента по 15 см³ в 5 круглодонных колб для упаривания вместимостью 50 см³. Растворы упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе, сухой остаток растворяют в 1 см³ ацетона, анализируют содержание фипронила и фипронил-сульфона по п. 9.3.1 или 9.3.2.

Фракции, содержащие фипронил и фипронил-сульфон, объединяют и вновь анализируют. Устанавливают уровень веществ в элюате, определяют полноту смывания с колонки и необходимый для очистки объем элюента.

Примечание. Проверку хроматографического поведения веществ следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии сорбентов и растворителей.

7.9. Установление градуировочных характеристик

Градуировочные характеристики, выражающие линейную (с угловым коэффициентом) зависимость площади пика от концентрации фипронила или фипронил-сульфона в растворе, устанавливают методом абсолютной калибровки по 5 растворам для градуировки № 2 - 6 (серия 1) и № 2′ - 6′ (серия 2).

В инжектор газового хроматографа вводят по 1 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.3.1 или п. 9.3.2. Осуществляют не менее 3 параллельных измерений. Устанавливают площади пиков веществ, на основании которых строят градуировочные зависимости.

8. Отбор и хранение проб

Отбор проб осуществляют в соответствии с ГОСТ 30363-13 «Продукты яичные жидкие и сухие пищевые. Технические условия», ГОСТ 31654-12 «Яйца куриные пищевые. Технические условия», ГОСТ 31467-12 «Мясо птицы, субпродукты и полуфабрикаты из мяса птицы. Методы отбора проб и подготовка их к испытаниям».

Пробы продуктов яичных сухих пищевых хранят при комнатной температуре не более 2 недель. Пробы яиц хранят при температуре (4 ± 2)°С не более недели, мяса и субпродуктов птиц - не более суток. Для длительного хранения пробы продуктов яичных сухих пищевых, яиц, мяса и субпродуктов птицы помещают в морозильную камеру (температура не выше -18 °С).

9. Выполнение определения

9.1. Способ 1

9.1.1 Экстракция

Образец продуктов яичных сухих пищевых, взбитых яиц, измельченного мяса или субпродуктов птицы массой 10 г помещают в центрифужную полипропиленовую пробирку вместимостью 50 см³. Пробу взбитых яиц, измельченного мяса и субпродуктов птицы помещают на 10 - 15 мин в морозильную камеру. Добавляют 10 см³ 1 %-го раствора уксусной кислоты в ацетонитриле (подготовленного по п. 7.5). Далее в пробу меланжа вносят 10 см³ бидистиллированной воды, в пробу порошка яичного белка пастеризованного - 15 см³ бидистиллированной воды. Помещают в пробирку керамический гомогенизатор, закрывают крышку и интенсивно встряхивают вручную 1 мин, вносят в пробирку смесь солей для экстракции (приготовленную по п. 7.6), закрывают крышкой и снова интенсивно встряхивают (вручную) в течение 1 мин. Затем пробу помещают на 10 - 15 мин в морозильную камеру, центрифугируют в течение 5 мин при скорости вращения 4000 об./мин и подвергают очистке с применением дисперсионной твердофазной экстракции по п. 9.1.2.

9.1.2. Очистка экстракта

Надосадочную жидкость (верхний слой в пробирке после центрифугирования) объемом 1,5 - 1,8 см³ с помощью пипетки переносят в полипропиленовую центрифужную пробирку, содержащую смесь сорбентов, приготовленную по п. 7.6. Закрывают крышку и интенсивно встряхивают вручную в течение 30 с. Центрифугируют 5 мин при скорости вращения 4000 об./мин и помещают в морозильник на 10 - 15 мин. Отбирают с помощью медицинского шприца раствор, фильтруют через мембранный фильтр (размер пор 0,22 мкм) в стеклянную виалу на 1,5 см³ и анализируют по п. 9.3.1 или 9.3.2.

9.2. Способ 2

9.2.1. Экстракция

Пробу продуктов яичных сухих пищевых, взбитых яиц, измельченного мяса или субпродуктов птицы массой 25 г помещают в коническую плоскодонную колбу вместимостью 250 см³, добавляют 100 см³ 30 %-го раствора ацетона в ацетонитриле (подготовленного по п. 7.3). Вручную перемешивают в течение 1 мин, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 15 с и помещают на аппарат для встряхивания на 15 мин. Затем пробу помещают на 1 ч в морозильную камеру.

Раствор фильтруют на воронке Бюхнера с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, через двойной фильтр средней плотности. Осадок на фильтре промывают 30 см³ 30 %-го раствора ацетона в ацетонитриле.

Объединенный отфильтрованный экстракт переносят в мерный цилиндр на 250 см³. Общий объем экстракта доводят до 150 см³ ацетонитрилом. Перемешивают и пипеткой вместимостью 10 см³ отбирают аликвоту объемом 6 см³ (1/25 часть экстракта, соответствует 1 г пробы) для очистки на колонке по п. 9.2.2.

9.2.2. Очистка экстракта на колонке с сорбентами

Аликвоту экстракта объемом 6 см³ (полученную по п. 9.2.1) наносят на колонку, подготовленную по п. 7.7. Скорость прохождения растворителя через колонку - 1 - 2 капли в секунду.

Фипронил и фипронил-сульфон элюируют с колонки 75 см³ ацетонитрила (элюент), собирая элюат в круглодонную колбу вместимостью 150 см³, раствор упаривают до объема приблизительно 5 см³ при температуре не выше 35 °С, переносят раствор в круглодонную колбу на 25 см³, омывая колбу на 150 см³ три раза ацетонитрилом порциями по 2 - 3 см³ и упаривают досуха при температуре не выше 35 °С. Сухой остаток растворяют в 1,0 см³ ацетона, помещают на ультразвуковую баню на 30 с и анализируют содержание веществ по п. 9.3.1 или 9.3.2.

Примечание. Объем элюента может быть изменен в соответствии с результатами проверки хроматографического поведения веществ на колонке по п. 7.7.

9.3. Условия хроматографирования

9.3.1. Метод газожидкостной хроматографии
с масс-селективным детектором (МСД)

Газовый хроматограф, снабженный масс-селективным детектором (МСД)

Хроматографическая капиллярная кварцевая колонка длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, содержащая сорбент: 5 % - фенил, 95 % - диметилполисилоксан (толщина пленки сорбента 0,25 мкм).

Температура детектора: квадруполя - 150 °С, источника - 230 °С, переходной камеры - 280 °С.

Температура испарителя: 270 °С.

Температура термостата колонки программированная. Начальная температура - 100 °С, выдержка 1 мин, нагрев колонки со скоростью 15 градусов в минуту до температуры 220 °С, выдержка 5 мин, затем нагрев колонки со скоростью 20 градусов в минуту до температуры 270 °С, выдержка 3 мин.

Газ 1 (гелий): поток в колонке 1,2 см³/мин,

давление 12,93 psi, средняя линейная скорость 40,853 см/с.

Хроматографируемый объем: 1 мм³.

Режим регистрации индивидуальных ионов

Отношение масса-заряд:

фипронил - 367 (количественный расчет), 255, 213

фипронил-сульфон - 383 (количественный расчет), 255, 452

Линейный диапазон детектирования: 0,002 - 0,05 нг.

Ориентировочное время удерживания: фипронила - 11,35 мин, фипронил-сульфона - 13,12 мин.

9.3.2. Метод газожидкостной хроматографии
электронозахватным детектором (ДЭЗ)

Газовый хроматограф, снабженный электронозахватным детектором (ДЭЗ)

Хроматографическая капиллярная кварцевая колонка длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, содержащая сорбент: 14 % - цианопропилфенил, 86 % - метилполисилоксан (толщина пленки сорбента 0,25 мкм).

Температура: детектора - 280 °С,

Испарителя - 260 °С

Температура термостата колонки программированная. Начальная температура - 180° С, выдержка 3 мин, нагрев колонки со скоростью 10 градусов в минуту до температуры 250 °С, выдержка 6 мин, затем нагрев колонки со скоростью 25 градусов в минуту до температуры 270 С.

Газ 1 (азот): давление 100 кПа, скорость 29 см/с.

Газ 2: деление потока 1:2, сброс 5,5 см³/мин.

Хроматографируемый объем: 2 мм³.

Линейный диапазон детектирования: 0,01 - 0,1 нг.

Ориентировочное время удерживания: фипронила - 10,59 мин, фипронил-сульфона - 12,31 мин.

Образцы, дающие пики большие, чем градуировочный раствор фипронила или фипронип-сульфона с концентрацией 0,05 мкг/см³, разбавляют ацетоном, не более чем в 50 раз.

10. Обработка результатов анализа

Содержание фипронила с учетом его метаболита фипронил-сульфона (в эквиваленте фипронила) в пробе (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:

А - концентрация фипронила, найденная по градуировочной характеристике в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см³;

Б - концентрация фипронил-сульфона, найденная по градуировочной характеристике в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см³;

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³;

V = 10 см³ (способ 1) и К = 1,0 см³ (способ 2);

m - масса анализируемого образца, г;

С - коэффициент пересчета, учитывающий объем аликвоты экстракта, взятой для анализа, С = 1 (способ 1), С = 25 (способ 2);

К - коэффициент пересчета содержания фипронил-сульфона на эквивалент фипронила по соотношению молекулярных масс (К = 0,96).

11. Проверка приемлемости результатов
параллельных определений

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:

X₁, Х₂ - результаты параллельных определений, мг/кг; r - значение предела повторяемости (табл. 1, 2), при этом r = 2,8σ_r.

При невыполнении условия выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

12. Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде:

( ± Δ) мг/кг при вероятности Р = 0,95, где

 - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

Δ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

δ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1, 2), %.

Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

«содержание фипронила и фипронил-сульфона в пробе продуктов яичных сухих пищевых, яиц, мяса и субпродуктов птицы: менее 0,002 мг/кг (метод газожидкостной хроматографии с масс-селективным детектором (МСД); менее 0,005 мг/кг (метод газожидкостной хроматографии с электронозахватным детектором (ДЭЗ)^*

________

^* 0,002 мг/кг; 0,005 мг/кг - нижние пределы количественного определения в пробе продуктов яичных сухих пищевых, яиц, мяса и субпродуктов птицы с применением МСД и ДЭЗ соответственно.

13. Контроль качества результатов измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1 - 6-02 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

13.1. Контроль стабильности градуировочной характеристики.

Контроль стабильности градуировочных характеристик проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.

При контроле стабильности градуировочных характеристик проводят измерения не менее двух градуировочных растворов, содержание фипронила и фипронил-сульфона в которых должно входить в диапазон линейности градуировочной характеристики от 0,002 до 0,05 мкг/см³ (МСД) и от 0,005 до 0,05 мкг/см³ (ДЭЗ).

Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:

X - концентрация фипронила или фипронил-сульфона в пробе при контрольном измерении, мкг/см³;

С - известная концентрация градуировочного раствора фипронила или фипронил-сульфона, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см³;

В - норматив контроля погрешности градуировочной характеристики, % (В = 10 % при Р = 0,95).

Если величина расхождения (А) превышает 10 %, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов фипронила и фипронил-сульфона, предусмотренных МИ. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики устанавливают ее заново согласно п. 7.9.

13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом «добавок».

Величина добавки С_д должна удовлетворять условию:

 - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно) мг/кг, при этом:

Δ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

δ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1, 2), %.

Результат контроля процедуры К_к рассчитывают по формуле:

, , С_д - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 11) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки соответственно, мг/кг.

Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

Проводят сопоставление результата контроля процедуры (К_к) с нормативом контроля (К).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

|Кк| ≤ К

(1)

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (1) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (1) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.

Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):

(2)

X₁, Х₂ - результаты измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), мг/кг;

R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1, 2), %.