Государственное санитарно-эпидемиологическое
нормирование 4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ Определение остаточных количеств Методические указания Москва 2016 1. Разработаны ФБУН «Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана» Роспотребнадзора (В.Н. Ракитский, Т.В. Юдина, М.В. Ларькина, С.К. Рогачева). 2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 22 мая 2015 г. № 1). 3. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 8 июля 2015 г. 4. Введены впервые. СОДЕРЖАНИЕ
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ Определение остаточных количеств тебуконазола Методические указания Свидетельство об аттестации № РОСС RU.0001.310430/0222.11.11.14. Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода капиллярной газожидкостной хроматографии для определения массовых концентраций тебуконазола в цитрусовых (плоды, сок), плодовых косточковых, плодовых семечковых, фруктах (манго, папайя, дыня), в орехах (древесных), томатах (плоды, сок), огурцах, перце, баклажанах, луке, капусте (брокколи, цветной, брюссельской, белокочанной), бананах и кофе (бобах) 0,01 - 0,1 мг/кг. Методические указания носят рекомендательный характер. Тебуконазол 4-Амино-3,6-дихлорпиридин-2-карбоновая кислота (ИЮПАК) Эмпирическая формула: C6H4Cl2N2O2. Молекулярная масса: 207,026. Желтоватый порошок. Температура плавления 163,5 - 165,2 °С, разлагается в точке плавления. Давление паров 9,52×10-9 Па (20 °С). Растворимость в воде 2,48 г/дм3 при 20 °С (pH = 2,35); 205 - 203 г/дм3 при 20 °С (pH = 7 и 9). Растворимость в органических растворителях при 20 °С (г/дм3): гептане < 10; ксилоле - 0,05; дихлорэтане - 0,15; этилацетате - 4,37; ацетоне - 37,0; метаноле - 66,4. Коэффициент распределения н-октанол/вода Kow log Р = 1,76 при pH = 5; 2,87 - при pH = 7; 2,96 - при pH = 9 (при температуре 19 °С). Краткая токсикологическая характеристика Острая пероральная токсичность (LD50) для крыс > 5000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD50) для крыс > 5000 мг/кг, острая ингаляционная токсичность LС50 крысы более 5500 мг/дм3. Область применения Тебуконазол - гербицид системного ауксиноподобного действия из группы пиридинкарбоновых кислот. Рекомендуется для послевсходовой обработки зерновых культур и пастбищ против широкого спектра широколистных сорняков. 1. Погрешность измеренийПри соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и её составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций. Метрологические параметры
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (n = 20) приведены в табл. 2.
2. Метод измеренийМетод основан на экстракции тебуконазола из исследуемой пробы растворителем, очистке экстрактов от коэкстрактивных компонентов перераспределением в системе несмешивающихся растворителей, далее на колонке с флорисилом с последующим измерением содержания тебуконазола методом капиллярной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с термоионным детектором (ТИД) при программировании температуры и обработкой хроматограмм методом абсолютной калибровки. 3. Средства измерений, вспомогательные устройства,
|
Газовый хроматограф, снабженный термоионным детектором с пределом детектирования по азоту в азобензоле 5×10-19 г/с, предназначенный для работы с капиллярной колонкой |
|
Барометр-анероид с диапазоном измерения атмосферного давления 5 - 790 мм рт. ст. и с пределом допустимой погрешности (1 ± 2,5) мм рт. ст. |
ТУ 2504-1799-75 |
Весы аналитические с пределом взвешивания 110 г и пределом допустимой погрешности ±0,001 г |
|
Весы лабораторные общего назначения, с наибольшим пределом взвешивания до 420 г и пределом допустимой погрешности ±0,01 г |
|
Колбы мерные вместимостью 2-100-2, 2-500-2, 2-1000-2 |
|
Меры массы |
|
Микропипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 0,1 см3 |
|
Микрошприц вместимостью 10 мм3 |
|
Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0; 2,0; 5,0 и 10 см3 |
|
Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 25, 50, 100 и 250 см3 |
Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
Тебуконазол, аналитический стандарт с содержанием основного компонента 99,1 % |
|
Азот газообразный (чистота 99,999 %) в баллонах |
ТУ 6-21-39-96 |
Ацетон, осч |
|
Вода для лабораторного анализа (деионизованная, бидистилированная) |
|
н-Гексан (гексан), осч |
ТУ 6-09-06-657-84 |
Калий марганцово-кислый (перманганат калия), хч |
|
Калий углекислый (карбонат калия, поташ), хч, прокаленный |
|
Кальций хлористый (хлорид), насыщенный водный раствор |
|
Кислота серная концентрированная, хч |
|
Кислота соляная (хлороводородная), хч |
|
Натрий серно-кислый (сульфат натрия) безводный, хч |
|
Натрий углекислый (карбонат натрия), хч |
|
Натрий хлористый, хч, 5 %-й водный раствор |
|
Флорисил, для колоночной хроматографии (60 - 100 меш.) |
|
Циклогексан для хроматографии, хч |
ТУ 2631-069-44493179-01 |
Этиловый эфир уксусной кислоты (этилацетат), хч |
Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующей дополнительной очистки растворителей.
Аппарат для встряхивания |
ТУ 64-1-2851-78 |
Баня водяная |
ТУ 2642-001-05015242-07 |
Баня ультразвуковая с рабочей частотой 35 кГц |
|
Бумажные фильтры средней и высокой плотности |
|
Воронка Бюхнера |
|
Воронка делительная вместимостью 250 см3 |
|
Воронки стеклянные конусные диаметром 40 - 45 мм |
|
Гигрометр с диапазоном измерений относительной влажности от 30 до 90 % |
ТУ 25-11-1645-84 |
Груша резиновая |
|
Гомогенизатор бытовой |
ТУ 9398-05-0576-9082-03 |
Колба Бунзена |
|
Колбы конические (плоскодонные) вместимостью 250 см3 |
|
Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 100 и 250 см3 |
|
Колонка стеклянная для препаративной хроматографии длиной 25 см, внутренним диаметром 10 - 12 мм |
|
Насос водоструйный вакуумный |
|
Ректификационная колонна с числом теоретических тарелок не менее 30 |
|
Ротационный вакуумный испаритель с мембранным насосом, обеспечивающий вакуум до 10 мбар |
|
Стаканы химические с носиком вместимостью 100, 250 см3 |
|
Стекловата |
|
Стеклянные палочки |
|
Термометр с диапазоном измерений от 0 до 55 °С и ценой деления 0,1 °С |
|
Установка для перегонки растворителей |
|
Хроматографическая кварцевая капиллярная колонка длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, содержащая сорбент: 5 % - фенилполисилоксан и 95 % - диметилполисилоксан (толщина пленки сорбента 0,25 мкм) |
|
Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны» и ГН 2.2.5.2308-07 «Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.
4.3. При работе с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 МПа (150 кгс/см2), необходимо соблюдать «Правила устройства и безопасной эксплуатации стационарных компрессорных установок, воздухопроводов и газопроводов под давлением», ПБ-03-576-03. Запрещается открывать вентиль баллона, не установив на нем понижающий редуктор.
К выполнению измерений допускают специалиста, имеющего квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на газовом хроматографе, освоившего данную методику и подтвердившего экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 13.
К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.
При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %;
- выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление градуировочных растворов, раствора внесения, установление градуировочной характеристики, приготовление смесей растворителей для экстракции и очистки экстрактов на колонке, подготовка колонки с силикагелем, проверка хроматографического поведения тебуконазола на ней.
7.1.1. Ацетон
Ацетон перегоняют над небольшим количеством марганцево-кислого калия и безводным карбонатом калия или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 30.
7.1.2. н-Гексан
Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над прокаленным карбонатом калия.
7.1.3. Этилацетат
7.1.3.1. Приготовление раствора натрия углекислого с массовой долей 5 %. Навеску (25 ± 0,1) г натрия углекислого помещают в мерную колбу вместимостью 500 см3, растворяют в бидистиллированной воде, доводят водой до метки, перемешивают.
7.1.3.2. Очистка растворителя. Этилацетат промывают последовательно 5 %-м водным раствором натрия углекислого, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над прокаленным карбонатом калия и перегоняют или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 30.
7.2.1. Исходный раствор тебуконазола для градуировки (концентрация 250 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 0,025 г тебуконазола, растворяют в 50 - 70 см3 ацетона, доводят до метки этим же растворителем, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение 3 месяцев.
7.2.2. Раствор № 1 тебуконазола для градуировки и внесения (концентрация 25 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 10 см3 исходного раствора тебуконазола для градуировки с концентрацией 250 мкг/см3 (п. 7.2.1), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают.
Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом «внесено-найдено» и контроля качества результатов измерений методом добавок.
Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.
7.2.3. Рабочие растворы № 2 - 5 тебуконазола для градуировки и внесения (концентрации 0,25 - 2,5 мкг/см3).
В 4 мерные колбы вместимостью 100 см3 помещают по 1,0; 2,0; 4,0 и 10 см3 раствора № 1 тебуконазола с концентрацией 25,0 мкг/см3 (п. 7.2.2), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 2 - 5 с концентрацией тебуконазола 0,25; 0,5; 1,0 и 2,5 мкг/см3 соответственно.
Растворы № 2 - 5 хранятся в течение 2 недель в холодильнике при температуре (4 ± 2) °С.
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (S, мВ⋅с) от концентрации тебуконазола в растворе (мкг/см3), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки № 2 - 5.
В инжектор хроматографа вводят 2 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.5. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.
Устанавливают площади пиков действующего вещества, на основании которых строят градуировочную зависимость.
7.4.1. Смесь ацетон-вода (объемное соотношение 2:1). В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 666 см3 ацетона и 333 см3 деионизованной воды, перемешивают.
7.4.2. Смесь гексан-этилацетат (объемное соотношение 8:2). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 80 см3 гексана и 20 см3 этилацетата, перемешивают.
7.4.3. Смесь гексан-этилацетат (объемное соотношение 4:6). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 40 см3 гексана и 60 см3 этилацетата, перемешивают.
Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см, внутренним диаметром 10 - 12 мм уплотняют тампоном из стекловаты, медленно выливают в колонку (при открытом кране) суспензию 5 г флорисила в 20 см3 гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента, на который помещают слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку последовательно промывают 20 см3 смеси гексан-этилацетат в объемном соотношении 8:2, скорость прохождения растворителя 1 - 2 капли в секунду, после чего она готова к работе.
В круглодонную колбу вместимостью 10 см3 помещают 0,2 см3 раствора № 1 тебуконазола для внесения с концентрацией 25,0 мкг/см3 (п. 7.2.2), упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре водяной бани не выше 35 °С. Сухой остаток растворяют в 3 см3 смеси гексан-этилацетат (в объемном соотношении 8:2), выдерживают на УЗ-бане в течение 60 секунд, далее наносят на колонку, подготовленную по п. 7.5. Колбу обмывают дважды этой же смесью растворителей, порциями по 3 см3, которые также наносят на колонку. Скорость прохождения растворителя через колонку - 1 - 2 капли в секунду.
Затем колонку промывают 40 см3 смеси гексан-этилацетат (8:2, по объему) со скоростью 1 - 2 капли в секунду, элюат отбрасывают. Действующее вещество смывают 80 см3 смеси гексан-этилацетат (4:6, по объему). Фракционно (по 10 см3) отбирают элюат, упаривают, остатки растворяют в 1 см3 этилацетата, анализируют содержание тебуконазола по п. 9.4.
Фракции, содержащие тебуконазол, объединяют и вновь анализируют.
Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с колонки и необходимый для очистки объем элюента.
Примечание. Проверку хроматографического поведения тебуконазола следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии сорбентов и растворителей.
Отбор проб производится в соответствии с правилами, определенными: ГОСТ 4427-82 «Апельсины. Технические условия»; ГОСТ 4428-82 «Мандарины. Технические условия»; ГОСТ 4492-82 «Лимоны. Технические условия»; ГОСТ 1725-85 «Томаты свежие. Технические условия»; ГОСТ Р 51810-01 «Томаты свежие, реализуемые в розничной торговой сети. Технические условия»; ГОСТ 1726-85 «Огурцы свежие. Технические условия»; ГОСТ 13908-68 «Перец сладкий свежий. Технические условия»; ГОСТ 1724-85 «Капуста белокочанная свежая, заготовляемая и поставляемая. Технические условия»; ГОСТ Р 51809-01 «Капуста белокочанная свежая, реализуемая в розничной торговой сети. Технические условия»; ГОСТ 7968-89 Капуста цветная свежая. Требования при заготовках, поставках и реализации»; ГОСТ 13907-86 «Баклажаны свежие. Технические условия»; ГОСТ Р 53071-08 «Баклажаны свежие, реализуемые в розничной торговле. Технические условия»; ГОСТ 7975-68 «Тыква продовольственная свежая. Технические условия»; ГОСТ Р 53088-08 «Лук порей свежий, реализуемый в розничной торговле. Технические условия»; ГОСТ 26313-84 «Продукты переработки плодов и овощей. Правила приемки, методы отбора проб», а также «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» (№ 2051-79 от 21.08.1979).
Отобранные пробы хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике в темноте не более 7 дней. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре не выше -18 °С.
Сок анализируют в день подготовки пробы.
Перед анализом образцы измельчают с помощью гомогенизатора.
Измельченные образцы исследуемых продуктов массой 25 г вносят в коническую колбу на 250 - 300 см3, добавляют 70 см3 смеси ацетон-вода (объемное соотношение 2:1), приготовленной по п. 7.4.1, интенсивно встряхивают вручную в течение 3 минут и помещают на аппарат для встряхивания на 30 минут.
Экстракт фильтруют на воронке Бюхнера с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, через двойной фильтр средней плотности. Осадок промывают дважды, по 20 см3, смесью ацетон-вода (объемное соотношение 2:1), объединенный экстракт переносят в круглодонную колбу для упаривания вместимостью 250 см3. Раствор упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 40 °С до водного остатка, к которому добавляют 10 см3 насыщенного раствора натрия хлористого и 20 см3 дистиллированной воды. Далее проводят экстракцию в системе несмешивающихся растворителей по п. 9.4 и очистку на колонке с флорисилом по п. 9.5.
Измельченные образцы массой 25 г вносят в коническую колбу на 250 - 300 см3, добавляют 70 см3 ацетонитрила, интенсивно встряхивают вручную в течение 3 минут и помещают на аппарат для встряхивания на 40 минут.
Экстракт фильтруют на воронке Бюхнера с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, через двойной фильтр средней плотности. Осадок промывают дважды, по 30 см3, ацетонитрила, объединенный экстракт переносят в делительную воронку вместимостью 250 см3. Дважды промывают содержимое воронки 20 см3 гексана, каждый раз встряхивая ее в течение 2 минут. Нижнюю ацетонитрильную фракцию собирают в круглодонную колбу для упаривания вместимостью 250 см3. Раствор упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 40 °С досуха.
Сухой остаток подвергают дополнительной очистке на колонке с флорисилом по п. 9.5.
Измельченные образцы массой 25 г вносят в коническую колбу на 250 - 300 см3, добавляют 70 см3 смеси ацетон-вода (объемное соотношение 2:1), приготовленной по п. 7.4.1, интенсивно встряхивают вручную в течение 3 минут и в течение 15 минут выдерживают на ультразвуковой бане.
Экстракт фильтруют на воронке Бюхнера с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, через двойной фильтр средней плотности. Осадок промывают дважды, по 30 см3, смесью ацетон-вода (объемное соотношение 2:1), выдерживая каждый раз на ультразвуковой бане по 15 минут, после чего фильтруют. Осадок на фильтре промывают 20 см3 гексана. Объединенный экстракт и промывную жидкость переносят в круглодонную колбу для упаривания вместимостью 250 см3. Раствор упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 40 °С до водного остатка, к которое добавляют 10 см3 насыщенного раствора натрия хлористого и 20 см3 дистиллированной воды. Далее проводят экстракцию в системе несмешивающихся растворителей по п. 9.4 и очистку на колонке с флорисилом по п. 9.5.
Водный остаток, насыщенный раствор натрия хлористого, полученный по п. 9.1, переносят в делительную воронку вместимостью 250 см3. Экстрагируют действующее вещество 50 см3 смеси циклогексан-этилацетат (1:1, по объему). Содержимое воронки интенсивно встряхивают в течение 2 - 3 мин. После полного разделения слоев, верхний органический слой (циклогексан-этилацетат) фильтруют через слой безводного сульфата натрия в колбу для упаривания вместимостью 250 см3. Водную фракцию возвращают и дважды повторяют экстракцию новыми порциями по 50 и 20 см3 указанной смеси.
Объединенный органический экстракт, пропущенный через безводный сульфат натрия, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35 °С. Сухой остаток подвергают дополнительной очистке на колонке с флорисилом по п. 9.5.
Сухие остатки, полученные по пп. 9.2, 9.3 или 9.4, находящиеся в колбе для упаривания, растворяют в 3 см3 смеси гексан-этилацетат (в объемном соотношении 8:2), выдерживают на УЗ-бане 60 с и наносят на колонку с флорисилом, подготовленную по п. 7.6. Колбу ополаскивают дважды порциями смеси гексан-этилацетат в объемном соотношении 80:20 по 3,0 см3, которую также наносят на колонку. Скорость прохождения растворителя через колонку - 1 - 2 капли в секунду. Промывают пробу 40 см3 смеси гексан-этилацетат в объемном соотношении 80:20, элюат отбрасывают.
Тебуконазол элюируют с колонки 80 см3 смеси гексан-этилацетат в объемном соотношении 4:6 со скоростью 1 - 2 капли в секунду, собирая элюат в круглодонную колбу вместимостью 150 см3, раствор упаривают досуха при температуре не выше 35 °С. Сухой остаток растворяют в 1 см3 ацетона и анализируют содержание тебуконазола методом ГЖХ по п. 9.6.
Газовый хроматограф, снабженный электронно-захватным детектором.
Хроматографическая кварцевая капиллярная колонка длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, содержащая сорбент: 5 % - фенилполисилоксан и 95 % - диметилполисилоксан (толщина пленки сорбента 0,25 мкм).
Температура детектора: 320 °С;
испарителя: 260 °С.
Температура термостата колонки программированная. Начальная температура - 150 °С, выдержка 1 мин, нагрев колонки со скоростью 20 градусов в минуту до температуры 235 °С, нагрев колонки со скоростью 3 градуса в минуту до температуры 245 °С, выдержка 2 мин, нагрев колонки со скоростью 20 градусов в минуту до температуры 270 °С.
Газ 1 (азот): давление 135 мПа, 36,66 см/с, поток 1,335 см3/мин.
Газ 2 (азот): деление потока 1:3; сброс 4 см3/мин (1 мин), увеличение скорости до 20 см/мин.
Скорость потока воздуха 200 см3/с, водорода 13 см3/мин.
Скорость газа 1 (азот): давление 90 кПа, 38,522 см3/с, поток 1,783 см3/мин.
Хроматографируемый объем: 2 мм3.
Линейный диапазон детектирования: 0,5 - 5,0.
Образцы, дающие пики большие, чем градуировочный раствор с концентрацией 2,5 мкг/см3, разбавляют ацетоном (не более, чем в 50 раз).
Содержание тебуконазола в пробе (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:
|
С - концентрация тебуконазола, найденная по градуировочной характеристике в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см3;
V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3;
m - масса анализируемого образца, г.
За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:
X1, Х2 - результаты параллельных определений, мг/кг;
r - значение предела повторяемости (табл. 1), при этом r = 2,8σr.
При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.
Результат анализа представляют в виде:
мг/кг при вероятности Р = 0,95, где |
- среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
Δ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:
|
δ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.
Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
«содержание тебуконазола в пробах цитрусовых (плоды и сок), плодовых косточковых, плодовых семечковых, томатах (плоды и сок), фруктов, дыни, огурцов, перца, баклажанов, лука, капусты, бананов - менее 0,01 мг/кг.*
* - 0,01 мг/кг - предел обнаружения тебуконазола в пробах цитрусовых (плоды и сок), плодовых косточковых, плодовых семечковых, орехах (древесных), томатах (плоды и сок), фруктов, дыни, огурцов, перца, баклажанов, лука, капусты, бананов и кофе (бобах).
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-02 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».
13.1. Контроль стабильности градуировочной характеристики.
Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.
При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее трех образцов концентраций для градуировки, содержание тебуконазола в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,25 до 2,5 мкг/см3.
Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:
|
X - концентрация тебуконазола в пробе при контрольном измерении, мкг/см3;
С - известная концентрация градуировочного раствора тебуконазола, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;
В - норматив контроля градуировочной характеристики, % (B = 10 % при Р = 0,95).
Если величина расхождения (А) превышает 10 %, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов тебуконазола, предусмотренных МВИ. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики устанавливают ее заново согласно п. 7.3.
Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
Величина добавки Сд должна удовлетворять условию:
|
- характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:
Δл = ±0,84Δ, где |
Δ - граница абсолютной погрешности, мг/кг:
|
δ - граница относительной погрешности методики (показатель точности, табл. 1), %.
Контрольный параметр процедуры Кк рассчитывают по формуле:
|
, , Сд - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 11) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки соответственно, мг/кг.
Норматив контроля К рассчитывают по формуле:
|
Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Кк) с нормативом контроля (К).
Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию
|Кк| ≤ К, |
(2) |
процедуру анализа признают удовлетворительной.
При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):
X1, Х2 - результаты измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), мг/кг;
R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.