МАССОВАЯ ДОЛЯ ГЕРБИЦИДОВ Методика измерений методом газожидкостной хроматографии ОБНИНСК
ФГБУ Предисловие 1 РАЗРАБОТАН Государственным учреждением «Научно-производственное объединение «НПО «Тайфун» (ГУ «НПО «Тайфун») 2 РАЗРАБОТЧИКИ Н.Н. Лукьянова, канд. хим. наук; Э.И. Бабкина, канд. хим. наук; Л.Б. Алексеева; Г.Н. Мальцев; Г.А. Шрайнер; Ж.Н. Трублаевич, канд. биол. наук; В.А. Красковская 3 СОГЛАСОВАН с УМЗА Росгидромета 24.01.2011 4 УТВЕРЖДЁН заместителем Руководителя Росгидромета 26.01.2011 5 СВИДЕТЕЛЬСТВО ОБ АТТЕСТАЦИИ выдано ГУ «НПО «Тайфун» № 18.16-2010 от 20.10.2010 6 ЗАРЕГИСТРИРОВАН ГУ «НПО «Тайфун» за номером РД 52.18.623-2011 от 02.02.2011 7 ВЗАМЕН РД 52.18.623-2001 Методические указания. Определение массовой доли гербицидов тиобенкарба и молината и идентификация пропанила и его метаболита 3,4-дихлоранилина в пробах почвы. Методика выполнения измерений методом газожидкостной хроматографии СОДЕРЖАНИЕ РУКОВОДЯЩИЙ ДОКУМЕНТ
Дата введения - 2012-01-01 1 Область применения1.1 Настоящий руководящий документ устанавливает методику измерений (далее - методика) массовой доли гербицидов бентиокарба и молината и идентификации пропанила и его метаболита* 3,4-дихлоранилина (3,4-ДХА) (далее - гербициды) в объединённых пробах почвы (далее - проба) методом газожидкостной хроматографии (ГЖХ). ________ * Продукт превращения пестицида в почве. 1.2 Методика позволяет определить массовую долю гербицидов в следующих диапазонах, мг/кг: - бентиокарб - от 0,04 до 13,00; - молинат - от 0,07 до 14,00. 1.3 Для пропанила и 3,4-ДХА методика позволяет только подтвердить наличие в почве, так как извлекаемость этих гербицидов из проб составляет от 10 % до 40 % от внесённого количества. Примечание - Гигиенические нормативы содержания гербицидов в почве, указанные в ГН 1.2.2701, составляют, мг/кг: - бентиокарб - не нормирован; - молинат - ОДК (ориентировочная допустимая концентрация) - 0,9; - пропанил - ПДК (предельно допустимая концентрация) - 15; - 3,4-дихлоранилин - не нормирован. 1.4 Настоящий руководящий документ предназначен для использования в лабораториях, осуществляющих наблюдения за остаточным количеством пестицидов в почве. 2 Нормативные ссылкиВ настоящем руководящем документе использованы ссылки на следующие стандарты: ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности ГОСТ 17.4.3.01-83 Охрана природы. Почвы. Общие требования к отбору проб ГОСТ 5180-84 Грунты. Методы лабораторного определения физических характеристик ГОСТ Р 8.589-2001 Государственная система обеспечения единства измерений. Контроль загрязнения окружающей природной среды. Метрологическое обеспечение. Основные положения ГН 1.2.2701-10 Гигиенические нормативы содержания пестицидов в объектах окружающей среды (перечень) МИ 1317-2004 Рекомендация. Государственная система обеспечения единства измерений. Результаты и характеристики погрешности измерений. Формы представления. Способы использования при испытаниях образцов продукции и контроле их параметров МИ 2335-2003 Рекомендация. Государственная система обеспечения единства измерений. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа РМГ 60-2003 Рекомендации по межгосударственной стандартизации. Государственная система обеспечения единства измерений. Смеси аттестованные. Общие требования к разработке РМГ 61-2003 Рекомендации по межгосударственной стандартизации. Государственная система обеспечения единства измерений. Показатели точности, правильности, прецизионности методик количественного химического анализа. Методы оценки РД 52.18.103-86 Методические указания. Охрана природы. Почвы. Оценка качества аналитических измерений содержания пестицидов и токсичных металлов в почве РД 52.18.156-99 Методические указания. Охрана природы. Почвы. Методы отбора объединённых проб почвы и оценки загрязнения сельскохозяйственного угодья остаточными количествами пестицидов Примечание - Ссылки на остальные нормативные документы приведены в разделе 4. 3 Требования к показателям точности измерений3.1 Погрешность измерений соответствует приписанным характеристикам, приведённым в таблице 1. Таблица 1 - Приписанные характеристики погрешности измерений
3.2 Значения показателя точности методики используют при: - оформлении результатов измерений; - оценке деятельности лабораторий на качество проведения измерений; - оценке возможности использования результатов измерений при реализации методики в конкретной лаборатории. 4 Требования к средствам измерений, вспомогательным устройствам, материалам, реактивам4.1 При выполнении измерений применяют следующие средства измерений: - весы неавтоматического действия высокого класса точности с наибольшим пределом взвешивания 500 г и пределом допустимой погрешности не более ±100 мг по ГОСТ Р 53228-2008; - весы неавтоматического действия специального класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г и пределом допустимой погрешности не более ±2 мг по ГОСТ Р 53228-2008; - хроматограф газовый (далее - хроматограф) с детектором типа электронного захвата по ТУ 1.550.150-85; - хроматограф газовый с термоионным или термоаэрозольным детектором по ТУ 1.550.150-85; - колонки газохроматографические стеклянные (далее - колонки) длиной от 1 до 2 м с внутренним диаметром не более 3 мм по ТУ 1.550.150-85; - термометр ртутный стеклянный лабораторный с диапазоном измерения от 0 °С до +150 °С и ценой деления 1 °С; - микрошприцы типа «Газохром-101» или МШ-10 М вместимостью 10 мм3 по ТУ 2.833.106-90; - пипетки типа 1, исполнения 1, вместимостью 1 и 2 см3; исполнения 1 или 2, вместимостью 5 и 10 см3 1-го класса по ГОСТ 29227-91; - микропипетки типа 1, исполнения 1, вместимостью 0,1 и 0,2 см3 по ТУ 33.1-14307481-037:2007; - колбы исполнения 2, вместимостью 25, 50, 100 см3, 2-го класса точности по ГОСТ 1770-74; - цилиндры исполнения 1 или 3, вместимостью 10, 25, 50, 1000 см3, 2-го класса точности по ГОСТ 1770-74; - пробирки исполнения 2, вместимостью 10, 15, 20 см3 с ценой деления 0,2 см3 по ГОСТ 25336-82; - линейка измерительная с пределом измерения 300 мм по ГОСТ 427-75. Примечание - Допускается применение средств измерений другого типа, имеющих метрологические характеристики, обеспечивающие точность измерений, указанную в таблице 1. 4.2 При выполнении измерений применяют следующие вспомогательные устройства: - аппарат для встряхивания проб почвы типа АВУ-1 по ТУ 64-1-2451-72; - плитка электрическая с закрытой спиралью мощностью 800 Вт; - баня водяная по ТУ 64-1-2850-76; - печь муфельная с рабочей камерой длиной 275 мм, шириной 195 мм, высотой 115 мм, максимальной температурой нагрева 900 °С; - шкаф сушильный с диаметром рабочей камеры (350 ± 5) мм и длиной (300 ± 5) мм, максимальной температурой разогрева 200 °С; - колбы типа Кн исполнения 1, с взаимозаменяемым конусом 29/32, номинальной вместимостью 250 см3 по ГОСТ 25336-82; - стаканы типа В исполнения 1, номинальной вместимостью 100 см3 по ГОСТ 25336-82; - стаканчики типа СВ с взаимозаменяемым конусом 14/8, 24/10 по ГОСТ 25336-82 (далее - бюксы); - воронки типа В, диаметром 56 мм, высотой 80 мм; диаметром 75 мм, высотой 110 мм по ГОСТ 25336-82; - установка для перегонки органических растворителей с основными размерами, приведёнными на рисунке 1 или колба Фаворского номинальной вместимостью 500 см3 по ГОСТ 25336-82; 1 - паз для термометра; 2 -
обратный холодильник; Рисунок 1 - Установка для перегонки органических растворителей - ступка № 4 наибольшим наружным диаметром 110 мм по ГОСТ 9147-80; - пестик № 2 высотой 120 мм по ГОСТ 9147-80; - ложка или шпатель № 1 длиной 120 мм по ГОСТ 9147-80: - эксикатор исполнения 2 диаметром корпуса 180 мм по ГОСТ 25336-82; - сито почвенное с диаметром отверстий 0,5 мм по ГОСТ 6613-86. Примечание - Допускается применение вспомогательных устройств другого типа, имеющих метрологические характеристики, обеспечивающие точность измерений, указанную в таблице 1. 4.3 При выполнении измерений применяют следующие реактивы и материалы: - бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026-76; - вата медицинская гигроскопическая, гигиеническая по ГОСТ 5556-81, обезжиренная (промытая ацетоном и н-гексаном); - вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72; - ацетон, ч.д.а., по ГОСТ 2603-79; - н-гексан, ч., по ТУ 6-09-3375-72, перегнанный; - азот газообразный особой чистоты 1-й сорт по ГОСТ 9293-74; - натрий сернокислый, х.ч., по ГОСТ 4166-76; - натрий углекислый кислый, х.ч., по ГОСТ 4201-79 (далее - натрий двууглекислый); - кальций хлористый технический кальцинированный высший сорт по ГОСТ 450-77 (далее - хлористый кальций); - гептафтормасляный ангидрид по ТУ 6-09-40-2578; - хроматон N-AW-DMCS или N-AW-HMDS зернения от 0,125 до 0,160 мм, или от 0,160 до 0,200 мм с нанесённой жидкой фазой SE-30, или ХЕ-60, или OV-17 в количестве 5 %; - отраслевой стандартный образец состава бентиокарба (сатурн) с аттестованным значением массовой доли 99,7 ± 0,9 % ОСО 113-04-109-92; - отраслевой стандартный образец состава молината (ялан, ордрам) с аттестованным значением массовой доли 99,2 ± 0,7 % ОСО 113-04-110-92; - государственный стандартный образец состава пропанила с аттестованным значением массовой доли 99,8 ± 0,14 % ГСО 6051-91; - стандартный образец состава 3,4-дихлоранилина (3,4-ДХА), х.ч., СО по ТУ 6-09-11-1325-79. Примечание - Допускается применение реактивов и материалов другого типа, имеющих метрологические характеристики, обеспечивающие точность измерений, указанную в таблице 1. 5 Метод измерений5.1 Метод измерений основан на извлечении гербицидов из почвы, их идентификации и определении их массовой доли в пробе. 5.1.1 Извлечение гербицидов из почвы производят путём их экстракции смесью ацетона и н-гексана (далее - гексан). 5.1.2 Идентификацию гербицидов проводят по времени удерживания, устанавливаемому с помощью градуировочного раствора. 5.1.3 Определение массовой доли гербицидов в пробе проводят методом ГЖХ путём сравнения высоты (площади) пиков анализируемого и градуировочного растворов. 5.2 Минимально детектируемая масса гербицидов в аликвоте составляет, нг: - бентиокарб - 2,5; - молинат - 2,5; - пропанил - 3,0; - 3,4-ДХА - 0,05. 6 Требования безопасности, охраны окружающей среды6.1 При выполнении измерений массовой доли гербицидов безопасность труда обеспечивают в соответствии с [1]. 6.2 При работе с вредными веществами необходимо соблюдать требования ГОСТ 12.1.007. Работы с органическими растворителями (изопропиловый спирт, гексан, ацетон), относящимися к легковоспламеняющимся жидкостям, должны проводиться с использованием приточно-вытяжной вентиляции вдали от огня и источников искрообразования, избегая попадания их паров в воздушную среду производственного помещения. 6.3 Оператор должен пройти инструктаж о мерах предосторожности при работе с электрическими приборами. 6.4 Помещение, в котором проводят анализы, должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией. 6.5 Сливы* органических растворителей, кислот, щелочей категорически запрещается выливать в канализацию. Сливы помещают в отдельные стеклянные бутылки или пластмассовые канистры, которые хранят в соответствии с требованиями к хранению легковоспламеняющихся жидкостей и кислот, изложенными в [1]. ________ * Отработанные растворы. 6.6 Ёмкости со сливами после заполнения транспортируют на городскую свалку в специально отведённое место или их содержимое сливают в специальные ёмкости, находящиеся на территории предприятия (организации). 7 Требования к квалификации операторовК выполнению измерений и обработке их результатов допускают лиц (инженер, техник или лаборант со средним специальным образованием), прошедших соответствующую подготовку, имеющих навыки работы в химической лаборатории и ознакомленных с руководством по эксплуатации хроматографа. 8 Требования к условиям измерений8.1 Выполнение измерений следует проводить при нормальных условиях:
8.2 Необходимым условием измерений является устранение влияния сопутствующих веществ, присутствующих в реактивах, фильтровальной бумаге, на стенках стеклянной посуды, а также коэкстрактивных (попутно извлекающихся) веществ. 9 Подготовка к выполнению измерений9.1 Требования к отбору и хранению проб9.1.1 Отбор проб для определения массовой доли гербицидов производят по ГОСТ 17.4.3.01 и РД 52.18.156. 9.1.2 Отбор проб для приготовления контрольных образцов (далее - КО), на основе которых готовят градуировочные растворы, проводят на фоновых (незагрязнённых) почвах (далее - ФП) обследуемых областей. Работы проводят согласно 9.1.1. 9.1.3 Пробы, высушенные до воздушно-сухого состояния, определяемого по ГОСТ 5180 как состояние равновесия с влажностью и температурой окружающего воздуха, хранят при нормальных условиях (8.1) в лабораторном помещении в упаковке из картона, ткани, крафт-бумаги или кальки. Примечание - Недопустимо использование для хранения проб пластмассовых материалов. 9.1.4 Сроки хранения проб, не более сут: - бентиокарба, молината - 14; - пропанила, 3,4-ДХА - 3. 9.1.5 Контроль сроков хранения проб проводят согласно РД 52.18.103. 9.2 Подготовка проб к анализу9.2.1 Из пробы, отобранной по 9.1.1 и высушенной до воздушно-сухого состояния, отбирают методом квартования пробу для анализа массой от 200 до 300 г. Из пробы для анализа тщательно удаляют корни и другие инородные частицы, почву растирают в фарфоровой ступке и просеивают через почвенное сито с диаметром отверстий 0,5 мм. 9.2.2 Часть пробы для анализа, подготовленной по 9.2.1, помещают с помощью ложки или шпателя в бюкс и на весах высокого класса точности взвешивают в бюксе одну навеску пробы массой 10 г. 9.3 Приготовление рабочих растворов9.3.1 Предварительную проверку чистоты применяемых реактивов и их очистку производят в соответствии с А.1 (приложение А). 9.3.2 Приготовление рабочего раствора натрия двууглекислого с массовой концентрацией 0,1 % производят следующим образом: - на весах высокого класса точности взвешивают в бюксе 0,1 г натрия двууглекислого и переносят его в мерную колбу вместимостью 100 см3; - вносят в колбу от 80 до 90 см3 дистиллированной воды. Содержимое колбы перемешивают вращательными движениями до полного растворения натрия двууглекислого и доводят до метки на колбе дистиллированной водой. 9.3.3 Рабочие растворы бентиокарба, молината и пропанила с массовой концентрацией 2000 мкг/см3 готовят по единой схеме следующим образом: - на весах специального класса точности взвешивают в бюксах навески отраслевых стандартных образцов (ОСО) состава бентиокарба, молината и навеску государственного стандартного образца (ГСО) состава пропанила массой по 0,1 г; - навески с помощью ацетона переносят в мерные колбы вместимостью 50 см3; - объём растворов доводят ацетоном до метки на колбах. Каждому из полученных растворов приписывают массовую концентрацию 2000 мкг/см3. 9.3.4 Рабочие растворы 3,4-ДХА готовят с тремя различными массовыми концентрациями следующим образом: 1) для приготовления раствора 3,4-ДХА с массовой концентрацией 300 мкг/см3 на весах специального класса точности в бюксе взвешивают навеску стандартного образца (СО) состава 3,4-ДХА массой 0,015 г; - навеску с помощью ацетона переносят в мерную колбу вместимостью 50 см3; - объём раствора доводят ацетоном до метки на колбе. Полученному раствору приписывают массовую концентрацию 3,4-ДХА 300 мкг/см3; 2) для приготовления раствора 3,4-ДХА с массовой концентрацией 3 мкг/см3 в мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят 1 см3 раствора 3,4-ДХА с массовой концентрацией 300 мкг/см3; - объём раствора доводят гексаном до метки на колбе. Полученному раствору приписывают массовую концентрацию 3,4-ДХА 3 мкг/см3; 3) для приготовления раствора 3,4-ДХА с массовой концентрацией 0,03 мкг/см3 в мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят 1 см3 раствора 3,4-ДХА с массовой концентрацией 3 мкг/см3; - объём раствора доводят гексаном до метки на колбе. Полученному раствору приписывают массовую концентрацию 3,4-ДХА 0,03 мкг/см3. 9.4 Приготовление аттестованной смеси гербицидов из рабочих растворов бентиокарба, молината и пропанилаПриготовление аттестованной смеси гербицидов (АСГ) бентиокарба, молината и пропанила производят следующим образом: - в мерную колбу вместимостью 100 см3 с помощью пипеток вместимостью 1 см3 вносят 0,8 см3 рабочего раствора бентиокарба с массовой концентрацией 2000 мкг/см3, 0,8 см3 рабочего раствора молината с массовой концентрацией 2000 мкг/см3 и 1 см3 рабочего раствора пропанила с массовой концентрацией 2000 мкг/см3; - объём раствора доводят до метки на колбе гексаном. Полученному раствору АСГ приписывают массовую концентрацию каждого гербицида, мкг/см3: 1) бентиокарб - 16; 2) молинат -16; 3) пропанил - 20. Примечания 1 Массовая концентрация и соотношение гербицидов в АСГ могут изменяться в зависимости от условий измерений (типа детектора, вида наполнителя в хроматографической колонке, массовой доли гербицидов в анализируемом экстракте). 2 В АСГ не вносят 3,4-ДХА ввиду того, что на основе полученной смеси готовят гексановый экстракт из КО почвы, тогда как схема анализа не предусматривает этой процедуры для 3,4-ДХА ввиду его низкой извлекаемости из почвы. 3 АСГ используют в качестве градуировочного раствора в случае низкой извлекаемости гербицидов из почвы или при отсутствии требуемого для приготовления КО типа почвы. Оценку погрешности приготовления АСГ проводят в соответствии с РМГ 60-2003. 9.4.1 Приготовление аттестованной смеси гербицидов из контрольных образцов9.4.1.1 Экстракты АСГ из КО (см. 9.1.2) готовят следующим образом: - производят по 9.1.2 отбор ФП для приготовления КО. Почва, используемая для приготовления КО должна быть аналогична по составу анализируемой почве; - в КО вносят согласно РД 52.18.103 АСГ, полученную по 9.4. Должно быть приготовлено не менее трёх КО с одинаковой массовой долей внесённых гербицидов; - проводят экстракцию АСГ из КО по 9.5.1; - экстракты АСГ из КО объединяют, приписывая соответствующую для каждого вещества массовую концентрацию. Например, в каждый КО внесено 10 мкг бентиокарба, 10 мкг молината и 15 мкг пропанила. После экстракции АСГ из КО и объединения гексановых экстрактов принимается общий объём экстракта АСГ из КО 30 см3, при этом массовая концентрация гербицидов в этом объёме составит для бентиокарба 1,0 мкг/см3, для молината - 1,0 мкг/см3, для пропанила - 1,5 мкг/см3. 9.4.1.2 Экстракты АСГ из КО используют в качестве градуировочных растворов при удовлетворительном извлечении гербицидов из почвы (от 80 % до 70 %), что устанавливают в предварительных экспериментах. 9.5 Приготовление почвенного экстракта из навески пробы9.5.1 Приготовление почвенного экстракта из навески пробы производят следующим образом: - приготовленные по 9.2.2 навески пробы через воронку помещают в конические колбы вместимостью 250 см3. В эти же колбы вносят по 5 см3 дистиллированной воды и по 5 см3 ацетона; - содержимое колб тщательно перемешивают вручную вращательными движениями и через период времени от 10 до 15 мин вносят в колбы по 10 см3 гексана, отобранного мерным цилиндром, вместимостью 10 см3; - колбы закрывают пробками и встряхивают с частотой 50 Гц на аппарате для встряхивания проб почвы в течение 15 мин, затем оставляют на 15 мин для разделения слоёв; - гексановый слой осторожно декантируют (сливают) в градуированные (что позволяет измерить объём) пробирки с притёртой пробкой вместимостью 15 см3, вносят в пробирки с гексаном по 0,3 г натрия сернокислого, подготовленного по А.1.12 (приложение А), и встряхивают вручную от 1 до 2 мин для высушивания почвенных экстрактов, готовых для проведения измерений. 9.5.2 Если при проведении измерений почвенных экстрактов, содержащих 3,4-ДХА, отмечена его низкая извлекаемость (высота пика менее 10 мм), проводят реакцию ацилирования (введение в молекулу 3,4-ДХА ангидрида гептафтормасляной кислоты) следующим образом: - вносят в пробирку вместимостью 10 см3 2 см3 почвенного экстракта; - с помощью микропипетки вместимостью 0,1 см3 добавляют 0,01 см3 гептафтормасляного ангидрида, встряхивают вручную и выдерживают при температуре рабочего помещения от 15 до 20 мин; - в реакционную смесь в пробирке микропипеткой вместимостью 0,2 см3 вносят 0,2 см3 рабочего раствора натрия двууглекислого с массовой концентрацией 0,1 %, пробирку закрывают пробкой и интенсивно встряхивают вручную в течение 2 мин (для разложения избытка гептафтормасляного ангидрида); - пробирку оставляют на 15 мин для разделения слоёв, после чего верхний гексановый слой хроматографируют, отбирая аликвоту из пробирки так, чтобы в микрошприц не попал нижний водный слой. 9.5.3 Если при проведении измерений почвенных экстрактов отмечена низкая извлекаемость бентиокарба, молината или пропанила (высота пика менее 10 мм), проводят концентрирование почвенных экстрактов. Пробирки с почвенными экстрактами помещают на водяную баню с температурой воды от 40 °С до 50 °С и проводят концентрирование до объёма от 4 до 5 см3. Дальнейшее концентрирование до объёма 2 см3 проводят при температуре рабочего помещения в вытяжном шкафу, после чего проводят измерения. 9.6 Условия хранения рабочих и градуировочных растворов, почвенных экстрактов9.6.1 Рабочие и градуировочные растворы хранят в склянках с притёртыми пробками и наклеенными этикетками. 9.6.2 Почвенные экстракты хранят в холодильнике при температуре не выше +12 °С. 9.6.3 Растворы гербицидов хранят в мерных колбах с притёртыми пробками в холодильнике при температуре +10 °С до +12 °С. 9.6.4 Рабочие и градуировочные растворы гербицидов с массовой концентрацией от 0,03 до 1,5 мкг/см3 хранят не более 1 мес. 9.6.5 Рабочие и градуировочные растворы гербицидов с массовой концентрацией от 3 до 20 мкг/см3 хранят не более 3 мес. 9.6.6 Рабочие растворы гербицидов с массовой концентрацией от 300 до 2000 мкг/см3 хранят не более 0,5 года. 10 Порядок выполнения измерений10.1 Подготовку к работе хроматографа и кондиционирование колонок проводят в соответствии с руководством по эксплуатации, прилагаемым к хроматографу. 10.2 Для проверки чистоты реактивов и материалов при анализе каждой партии проб выполняют бланковое («холостое», т.е. исключающее почву) определение. Если пики на хроматограмме «холостого» опыта совпадают по времени удерживания хотя бы с одним пиком какого-либо из определяемых гербицидов, то необходимо путём постадийного исследования установить и устранить причину загрязнения. 10.3 Проводят установление для каждого гербицида линейного диапазона детектирования (ЛДД), т.е. линейной зависимости между величиной аналитического сигнала и количеством гербицида, введённого в хроматограф. При отсутствии ЛДД проводят построение градуировочного графика зависимости величины аналитического сигнала от количества введённого в хроматограф гербицида. 10.4 Операции по 10.2 - 10.3 проводят в соответствии с приложением А. 10.5 Измерения почвенных экстрактов, полученных по 9.5.1, проводят с использованием термоионного детектора в режиме программирования температуры; пример параметров выполнения измерений приведён в таблице 2. Если проводилось ацилирование по 9.5.2, измерения проводят с использованием детектора по типу электронного захвата; рекомендуемые параметры выполнения измерений указаны в таблице 3. 10.6 Абсолютное и относительное к молинату время удерживания гербицидов при указанных в таблицах 2 и 3 параметрах выполнения измерений приведено в таблице 4. 10.7 Вводят в хроматограф 2 мм3 растворителя для проверки чистоты колонки и оценки фонового* сигнала. ________ * Выходной сигнал детектора при отсутствии в детекторе анализируемого вещества. 10.8 После выхода хроматографа на рабочий режим и стабилизации нулевой линии вводят в хроматограф аликвоту градуировочного раствора, определяя время удерживания гербицидов.
10.9 Вводят в хроматограф аликвоту почвенного экстракта. Объём аликвоты должен быть не менее 2 мм3 при использовании микрошприца вместимостью 10 мм3. Аликвоты градуировочного раствора и почвенного экстракта пробы почвы должны иметь одинаковый объём. 10.10 Возникающий после введения испытуемого раствора аналитический сигнал регистрируется потенциометром, автоматически обрабатывается и записывается самописцем на ленте или при использовании компьютерных систем сбора и обработки хроматографических данных выводится на экран дисплея компьютера в виде графического изображения - пика. 10.11 В качестве расчётного параметра при записи хроматограммы на ленте используют высоту пика, измеряемую линейкой. При высоте пика менее 10 мм выполняют операции по 9.5.2 или 9.5.3. Расчёты по площади пика проводят с помощью компьютерных средств с использованием соответствующей компьютерной программы обработки результатов. В этом случае хроматограмма автоматически запоминается под введённым оператором именем и может быть выведена на экран дисплея компьютера. 10.12 Для получения достоверного результата каждый испытуемый раствор измеряют не менее трёх раз. 10.13 Измерения следует проводить в установленном ЛДД. 10.14 Для устранения мешающего влияния коэкстрактивных веществ измерения проводят с использованием альтернативных неподвижных жидких фаз, например таких, как OV-17 и ХЕ-60, что позволяет не только доказать правильность идентификации определяемых гербицидов, но и устранить мешающее влияние практически всех гербицидов, которые могут извлекаться данной методикой, за исключением трифлуралина, который мешает определению молината и при использовании альтернативных фаз. Пример хроматограммы смеси гербицидов, полученной с использованием неподвижной жидкой фазы OV-17, приведён на рисунке 2. 10.15 Расчёт массовой доли гербицидов в пробе проводят по результатам измерений, полученным при использовании той неподвижной жидкой фазы, где сигнал не искажён влиянием коэкстрактивных веществ. 1 - 3,4
- ДХА; 2 - молинат; 3 - пропанил; Рисунок 2 - Хроматограмма смеси гербицидов на колонке 11 Обработка результатов измерений11.1 Расчёт массовой доли гербицида в пробе при наличии ЛДД проводят в зависимости от условий измерений по формулам (1) - (5). 11.2 Если в качестве градуировочного раствора используют экстракт АСГ из КО, приготовленный по 9.4.1, массовую долю гербицидов в пробе X, мг/кг, рассчитывают по формуле где Сгр - массовая концентрация гербицида в градуировочном растворе, м кг/см3; , - величина аналитического сигнала почвенного экстракта и градуировочного раствора соответственно; V - объём почвенного экстракта, равный 10 см3; m - масса навески воздушно-сухой пробы почвы, г. Примечание - Поскольку при получении почвенного экстракта по 9.5.1 первоначально внесённый в колбу объём гексана составляет 10 см3, именно этот объём используют в расчётной формуле, даже если при разделении водно-ацетонового и гексанового слоёв слой гексана будет декантирован не полностью. 11.3 Если почвенный экстракт подвергают концентрированию по 9.5.3, расчёт массовой доли гербицида в пробе X, мг/кг, проводят по формуле где V1 - объём почвенного экстракта, подвергаемого концентрированию, см3; V2 - объём почвенного экстракта после концентрирования, см3. 11.4 Если в качестве градуировочного раствора используют АСГ, полученную по 9.4, расчёт массовой доли гербицидов в пробе X, мг/кг, проводят по формуле где R - поправочный множитель, определяемый согласно РД 52.18.103, рассчитанный по формуле где Ввнес - масса гербицида, внесённая в КО, мкг; Вобнар - масса гербицида, обнаруженная в КО, мкг. Примечание - При расчётах используют среднее арифметическое из трёх значений аналитического сигнала, величина каждого из которых не должна превышать 7 % от среднего арифметического значения. 11.5 Конечный результат А, мг/кг, представляют по форме в соответствии с МИ 1317
где X - массовая доля гербицида в пробе, рассчитанная по формулам (1), (2) или (4), мг/кг; ±Δ - границы характеристики погрешности результата измерений, соответствующие диапазону, в который попадает величина X, мг/кг. Примечание - Если высота (площадь) пика на хроматограмме соответствует значению массовой доли анализируемых гербицидов менее нижней границы диапазона измерений, в рабочем журнале делают запись: «массовая доля гербицида (наименование) в пробе менее (величина нижней границы диапазона измерений)». 11.6 Значения приписанных характеристик погрешности измерений приведены в таблице 1. 11.7 Числовое значение результата измерений должно оканчиваться цифрой того же разряда, что и значение характеристики погрешности измерений. 11.8 В соответствии с РМГ 61 характеристики погрешности измерений выражают числом, содержащим не более двух значащих цифр. 11.9 Результаты измерений оформляют записью в рабочем журнале по установленной в лаборатории форме. 12 Контроль точности результатов измерений12.1 Внутренний оперативный контроль (далее - оперативный контроль) точности результатов измерений (повторяемости, воспроизводимости, погрешности измерений) проводят в соответствии с ГОСТ Р 8.589 и МИ 2335 по установленным нормативам оперативного контроля, рассчитанным на основе характеристик погрешности методики и её составляющих. Значения нормативов оперативного контроля приведены в таблице 5. 12.2 Периодичность оперативного контроля повторяемости - не менее одной контрольной пробы для каждой партии от 15 до 20 проб за период, в течение которого условия проведения анализа соответствуют условиям проведения контрольных определений. Для проведения оперативного контроля повторяемости из пробы с величиной массовой доли гербицидов, превышающей нижнюю границу диапазона измерений, отбирают 2 навески пробы: основную и контрольную. Таблица 5 - Значения пределов повторяемости, воспроизводимости, погрешности выполнения измерений при Р = 0,95
12.3 Выполняют анализ основной и контрольной навесок пробы в условиях повторяемости (условия, при которых результаты единичного анализа получают по одной и той же методике на одних и тех же пробах в одинаковых условиях практически одновременно). 12.3.1 Расхождение между результатами измерений основной и контрольной навесок пробы, полученными в одной лаборатории при соблюдении условий повторяемости, не должно превышать предела повторяемости r. 12.3.2 Предел повторяемости rк, мг/кг, результатов измерений двух параллельных навесок пробы признают удовлетворительным, если
где X1, Х2 - результаты измерений массовой доли гербицидов в пробе, полученные в условиях повторяемости; r - предел повторяемости, определяемый по таблице 5 для , мг/кг. 12.4 Для проведения оперативного контроля воспроизводимости из пробы с величиной массовой доли гербицидов, превышающей нижнюю границу диапазона измерений, отбирают 2 навески. 12.4.1 Выполняют анализ двух навесок пробы, отобранных по 12.4, в условиях воспроизводимости - условия, при которых результаты анализа получают по одной и той же методике на одних и тех же пробах, но в различных условиях (разное время, разные аналитики, разные партии реактивов одного типа и т.п.). 12.4.2 Расхождение между результатами измерений двух навесок пробы, полученными в условиях воспроизводимости, не должно превышать предела воспроизводимости R. 12.4.3 Предел воспроизводимости Rк, мг/кг, результатов измерений двух параллельных навесок пробы признают удовлетворительным, если
где X1, Х2 - результаты измерений массовой доли гербицида в пробе, полученные в условиях воспроизводимости; R - предел воспроизводимости, определяемый по таблице 5 для , мг/кг. Примечание - Контроль воспроизводимости проводят при необходимости сравнения результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости не реже чем 1 раз в 1 год. 12.5 При выполнении условий, указанных в 12.3.2 и 12.4.3, окончательным результатом может служить среднее арифметическое значение результатов измерений двух параллельных навесок пробы. 12.6 Оперативный контроль погрешности измерений проводят с использованием метода добавок с периодичностью 2 раза в 1 год. 12.6.1 Для проведения оперативного контроля погрешности измерений для одной из проб делают две навески - основную и контрольную. 12.6.2 В контрольную навеску вносят добавку АД. Добавкой является АСГ, приготовленная по 9.4. 12.6.3 Массу гербицидов в добавке АД) мкг, рассчитывают по формуле
где САСГ - массовая концентрация гербицидов в АСГ, мкг/см3; VАСГ - объём внесённой АСГ, см3. 12.6.4 Массовая доля гербицидов в контрольной навеске после внесения добавки должна составлять не более 100 % от возможной массовой доли гербицидов в пробе без добавки, т.е. в основной пробе. 12.6.5 При отсутствии гербицидов в основной пробе их массовая доля в контрольной навеске после внесения добавки должна быть не менее удвоенной минимально определяемой массовой доли гербицидов. 12.6.6 Внесение добавки проводят согласно РД 52.18.103. 12.6.7 Проводят в одно время и в одинаковых условиях определение массовой доли гербицидов в основной пробе X и в контрольной навеске с добавкой ХД. 12.6.8 Результат оперативного контроля погрешности измерений Кк признают удовлетворительным, если выполняется условие
где АД - масса добавки, внесённой в контрольную навеску, мкг; Р - масса навески пробы, г; КД - норматив оперативного контроля погрешности измерений, приведённый в таблице 5. 12.7 Если какое-либо из условий, указанных в 12.3.2, 12.4.3 и 12.6.8, не выполняется, измерения повторяют с использованием других навесок пробы. При повторном невыполнении условия выясняют причины неудовлетворительного результата и устраняют их. 13 Затрата рабочего времени на определение массовой доли гербицидов в пробах почвы13.1 В таблице 6 представлена ориентировочная величина количества рабочего времени, затрачиваемого одним оператором на единовременное проведение анализа 6 проб почвы. 13.2 При проведении реакции ацилирования 3,4-ДХА затрата рабочего времени увеличивается, что отражено в таблице 7. 13.3 В таблице 8 представлена ориентировочная величина рабочего времени, затрачиваемого одним оператором на подготовку и очистку реактивов.
Приложение А
|
Ключевые слова: методические указания, измерение массовой доли, метод газожидкостной хроматографии, гербициды, бентиокарб, молинат, проба почвы, контроль погрешности измерений |