Государственное
санитарно-эпидемиологическое нормирование
Российской Федерации
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Фотометрическое измерение концентраций левана (полисахарида микробного происхождения) в воздухе рабочей зоны
МУК 4.1.238-96
Минздрав России
Москва 2000
1. Методические указания по измерению концентрации вредных веществ в воздухе рабочей зоны (выпуск 30) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочно безопасным уровням воздействия (ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.
2. Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны утверждены и. о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместителем Главного государственного санитарного врача Российской Федерации 8 июня 1996 г.
3. Введены впервые.
4. Включенные в данный выпуск 74 методики контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТа 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования", ГОСТа 12.1.016-79 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ" и ГОСТа Р 1.5-92 п. 7.3.
Методические указания одобрены на совместном заседании группы Главного эксперта Федеральной комиссии по санитарно-гигиеническому нормированию "Лабораторно-инструментальное дело и метрологическое обеспечение" и методбюро п/секции "Промышленно-санитарная химия" Проблемной комиссии "Научные основы гигиены труда и профпатологии".
Ответственные исполнители: Г. А. Дьякова, C. И. Муравьева
Исполнители: Г. А. Дьякова, Н. С. Горячев. Л. Г. Макеева, Г. В. Муравьева, Е. М. Малинина, Е. В. Грыжина, Е. Н. Грицун.
УТВЕРЖДЕНО
И. о. Председателя Госкомсанэпиднадзора
России - заместителем Главного
государственного санитарного врача
Российской Федерации
Г.Г. Онищенко
8 июня 1996 г.
МУК 4.1.238-96
Дата введения: с момента утверждения
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
(С6Н10О5)n M.м. 106 - 107
Леван - кетогексоза-полифруктофураноза - микробный полисахарид, состоящий из Д-фруктофуранозильных остатков, соединенных между собой связями С-2,6. Порошок белого цвета, со слабым запахом, гигроскопичен.
Растворяется в воде, не растворяется в этаноле, метаноле, ацетоне. В воде легко набухает и образует вязкие коллоидные растворы.
В воздухе находится в виде аэрозоля.
ПДК в воздухе - 1 мг/м3.
Характеристика метода
Методика основана на реакции взаимодействия левана с резорцином в кислой среде и последующем фотометрическом измерении продукта реакции окрашенного в красно-оранжевый цвет, при длине волны 40 нм.
Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.
Нижний предел обнаружения вещества в анализируемом объеме составляет - 5 мкг.
Нижний предел измерения вещества в воздухе - 0,5 мг/м3 (при отборе 10 л воздуха).
Диапазон измеряемых концентраций в воздухе - от 0,5 до 10 мг/м3.
Определению не мешают питательные среды и культура Zymomonas mobilis.
Суммарная погрешность измерения не превышает ± 10 %.
Время выполнения измерения, включая отбор проб, - 30 мин.
Приборы, аппаратура, посуда
|
Спектрофотометр |
|
|
Аспирационное устройство, модель 822 |
ТУ 611-1-862-82 |
|
Фильтродержатели |
|
|
Мерные колбы, вместимостью 25, 50 и 100 мл |
|
|
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл |
ГОСТ 20292-77 |
|
Воронки стеклянные, диаметром 30 мм |
ГОСТ 8613-76 |
|
Стаканы химические, вместимостью 50 мл |
ГОСТ 810394-72 |
|
Колориметрические пробирки с пришлифованными пробками |
ГОСТ 10615-75 |
Реактивы, растворы, материалы
Леван
Стандартный раствор № 1 с концентрацией левана 100 мкг/мл готовят растворением 2,5 г вещества в 0,1 н НСl в мерной колбе на 25 мл. Раствор устойчив 7 дней.
Стандартный раствор № 2 с концентрацией 10 мкг/мл готовят путем соответствующего разведения стандартного раствора № 1 0,1 н НСl. Готовят перед использованием.
|
Соляная кислота, х. ч. концентр. 0,1 н р-р. |
ГОСТ 3118-11 |
|
Резорцин, 1 %-ный спиртовой р-р |
ГОСТ 11168-71 |
|
Железоаммонийные квасцы, 0,03 %-ный р-р в концентрированной соляной кислоте |
ГОСТ 4205-68 |
|
Этиловый спирт, ректификат, х. ч. |
ГОСТ 18954-79 |
|
Фильтры АФА-ХА-20 |
Отбор пробы воздуха
Воздух со скоростью 2 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ХА, укрепленный в фильтродержателе. Пробы устойчивы.
Для определения 1/2 ПДК достаточно отобрать 10 л воздуха.
Подготовка к измерению
Градуировочные растворы (устойчивы в течение 3 часов) готовят согласно таблице.
Таблица
|
№ стандарта |
Стандартный р-р с концентрацией |
0,1 н НСl, мл |
Содержание левана, мкг |
|
|
10 мкг/мл |
100 мкг/мл |
|||
|
1 |
- |
- |
5,0 |
0 |
|
2 |
0,5 |
- |
4,5 |
5 |
|
3 |
1,0 |
- |
4,0 |
10 |
|
4 |
2,0 |
- |
3,0 |
20 |
|
5 |
- |
0,3 |
4,7 |
30 |
|
6 |
- |
0,5 |
4,5 |
50 |
|
7 |
- |
1,0 |
4,0 |
100 |
В каждую пробирку добавляют по 1 мл 1 % раствора резорцина и по 3 мл 0,03 % р-ра железоаммонийных квасцов. После добавления каждого реактива растворы перемешивают. Помещают в кипящую водяную баню на 15 мин. Охлаждают, измеряют оптическую плотность стандартных растворов на спектрофотометре при длине волны 480 нм. Измерения проводят в кювете с толщиной слоя 10 мм по отношению к раствору сравнения, не содержащему левана (стандарт № 1 по таблице). Строят градуировочный график по средним значениям оптических плотностей раствора 5 шкал стандартов; на ось ординат наносят значения оптических плотностей, на ось абсцисс - соответствующие им величины содержания левана (мкг) в градуировочном растворе.
Проверку градуировочного графика проводят 1 раз в месяц или в случае использования новой партии реактивов.
Проведение измерения
Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан и промывают 5 мл 0,1 н НСl в 3 приема, смывая каждый раз жидкость в пробирку, тщательно отжимая фильтр на стенке стакана стеклянной палочкой. Объем в пробирке доводят до 15 мл 0,1 н р-ром НСl, перемешивают. Из полученного раствора отбирают 5 мл в другую пробирку, добавляют 1 мл 1 %-ный раствора резорцина и по 3 мл 0,03 %-ного раствора железоаммонийных квасцов. После добавления каждого реактива растворы перемешивают, помещают в кипящую водяную баню на 15 мин. Охлаждают, измеряют оптическую плотность аналогично градуировочным растворам. Раствором сравнения служит контрольный раствор, который готовят одновременно, аналогично пробам, используя чистый фильтр.
Количественное определение проводят по градуировочному графику.
Расчет концентрации
Концентрацию левана (Q в воздухе (мг/м3) вычисляют по формуле:
, где
а - содержание левана в анализируемом объеме пробы, мкг;
в - общий объем пробы, мл;
б - объем раствора пробы, взятой для анализа, мл;
V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (см. приложение 1).
Методические указания разработаны Рижским мединститутом, НИО «Экотокс», г. Москва.
Приложение 1
Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температуре 20 °С и давление 760 мм рт. ст.)
Приведение объема воздуха к стандартным условиям проводят по формуле:
,
где
Vt - объем воздуха, отобранного для анализа, л;
Р - барометрическое давление, мм рт. ст. (760 мм рт. ст. = 101,33 кПа);
t° - температура воздуха в месте отбора пробы, °С.
Для удобства расчета Vст следует пользоваться таблицей коэффициентов (приложение 2). Для приведения объема воздуха к температуре 20 °С и давлению 760 мм рт. ст. (101,33 кПа) надо умножить Vt на соответствующий коэффициент.
Приложение 2
Коэффициент К для приведения объема воздуха к стандартным условиям
|
Давление Р, кПа/мм рт. ст. |
||||||||||
|
°С |
730 |
734 |
738 |
742 |
746 |
750 |
754 |
758 |
760 |
764 |
|
-30 |
1,1582 |
1,1646 |
1,1709 |
1,1772 |
1,1836 |
1,1899 |
1,1963 |
1,2026 |
1,2058 |
1,2122 |
|
-26 |
1,1393 |
1,1456 |
1,1519 |
1,1581 |
1,1644 |
1,1705 |
1,1768 |
1,1831 |
1,1862 |
1,1925 |
|
-22 |
1,1212 |
1,1274 |
1,1336 |
1,1396 |
1,1458 |
1,1519 |
1,1581 |
1,1643 |
1,1673 |
1,1735 |
|
-18 |
1,1036 |
1,1097 |
1,1158 |
1,1218 |
1,1278 |
1,1338 |
1,1399 |
1,1400 |
1,1490 |
1,1551 |
|
-14 |
1,0866 |
1,0926 |
1,0986 |
1,1045 |
1,1105 |
1,1164 |
1,1224 |
1,1284 |
1,1313 |
1,1373 |
|
-10 |
1,0701 |
1,0760 |
1,0819 |
1,0877 |
1,0986 |
1,0994 |
1,1053 |
1,1112 |
1,1141 |
1,1200 |
|
-6 |
1,0540 |
1,0599 |
1,0657 |
1,0714 |
1,0772 |
1,0829 |
1,0887 |
1,0945 |
1,0974 |
1,1032 |
|
-2 |
1,0385 |
1,0442 |
1,0499 |
1,0556 |
1,0613 |
1,0669 |
1,0726 |
1,0784 |
1,0812 |
1,0869 |
|
0 |
1,0309 |
1,0366 |
1,0423 |
1,0477 |
1,0535 |
1,0591 |
1,0648 |
1,0705 |
1,0733 |
1,0789 |
|
+2 |
1,0234 |
1,0291 |
1,0347 |
1,0402 |
1,0459 |
1,0514 |
1,0571 |
1,0627 |
1,0655 |
1,0712 |
|
+6 |
1,0087 |
1,0143 |
1,0198 |
1,0253 |
1,0309 |
1,0363 |
1,0419 |
1,0475 |
1,0502 |
1,0557 |
|
+10 |
0,9944 |
0,9999 |
1,0054 |
1,0108 |
1,0162 |
1,0216 |
1,0272 |
1,0326 |
1,0353 |
1,0407 |
|
+14 |
0,9806 |
0,9860 |
0,9914 |
0,9967 |
1,0027 |
1,0074 |
1,0128 |
1,0183 |
1,0209 |
1,0263 |
|
+18 |
0,9671 |
0,9725 |
0,9778 |
0,9880 |
0,9884 |
0,9936 |
0,9989 |
1,0043 |
1,0069 |
1,0122 |
|
+20 |
0,9605 |
0,9658 |
0,9711 |
0,9783 |
0,9816 |
0,9868 |
0,9921 |
0,9974 |
1,0000 |
1,0053 |
|
+22 |
0,9539 |
0,9592 |
0,9645 |
0,9696 |
0,9749 |
0,9800 |
0,9853 |
0,9906 |
0,9932 |
0,9985 |
|
+24 |
0,9475 |
0,9527 |
0,9579 |
0,9631 |
0,9683 |
0,9735 |
0,9787 |
0,9839 |
0,9865 |
0,9917 |
|
+26 |
0,9412 |
0,9464 |
0,9516 |
0,9566 |
0,9618 |
0,9669 |
0,9721 |
0,9773 |
0,9799 |
0,9851 |
|
+28 |
0,9349 |
0,9401 |
0,9453 |
0,9503 |
0,9655 |
0,9605 |
0,9657 |
0,9708 |
0,9734 |
0,9785 |
|
+30 |
0,9288 |
0,9339 |
0,9891 |
0,9440 |
0,9432 |
0,9542 |
0,9594 |
0,9645 |
0,9670 |
0,9723 |
|
+34 |
0,9167 |
0,9218 |
0,9268 |
0,9318 |
0,9368 |
0,9418 |
0,9468 |
0,9519 |
0,9544 |
0,9595 |
|
+38 |
0,9049 |
0,9099 |
0,9149 |
0,9198 |
0,9248 |
0,9297 |
0,9347 |
0,9397 |
0,9421 |
0,9471 |