ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО НАДЗОРУ
В СФЕРЕ ПРИРОДОПОЛЬЗОВАНИЯ

КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ВОД

МЕТОДИКА ИЗМЕРЕНИЙ
МАССОВЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ АЛЬДЕГИДОВ
В ПРОБАХ ПИТЬЕВЫХ И ПРИРОДНЫХ ВОД
МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ
ХРОМАТОГРАФИИ

ПНД Ф 14.2:4.227-2006

Методика допущена для целей государственного экологического контроля

МОСКВА
(издание 2018 г.)

Методика измерений аттестована Центром метрологии и сертификации «СЕРТИМЕТ» Уральского отделения РАН (Аттестат аккредитации № RA.RU.310657 от 12.05.2015), рассмотрена и одобрена федеральным государственным бюджетным учреждением «Федеральный центр анализа и оценки техногенного воздействия» (ФГБУ «ФЦАО»).

Настоящее издание методики введено в действие взамен ПНД Ф предыдущего издания и действует с 1 февраля 2019 года до выхода нового издания.

Сведения о методике переданы в Федеральный информационный фонд по обеспечению единства измерений.

Заместитель директора ФГБУ «ФЦАО»

________________ (подпись)

А.Б. Сучков

Разработчик:

ЗАО «РОСА», 2006

Адрес: 119297, г. Москва, уд. Родниковая, 7, стр. 35

Телефон: (495) 502-44-22, телефон/факс: (495) 439-52-13

http:// www.rossalab.ru

1 ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Настоящий нормативный документ устанавливает методику измерений массовых концентраций формальдегида и ацетальдегида в пробах питьевых и природных вод методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Примечание - Под питьевыми водами подразумеваются воды централизованных и нецентрализованных систем водоснабжения, воды расфасованные в емкости (упакованная питьевая вода), минеральные воды. Под природными водами подразумеваются поверхностные и подземные воды, в том числе источники питьевого водоснабжения, грунтовые, талые, атмосферные осадки (дождь, снег, град).

Допускается применение методики для анализа вод бассейнов и аквапарков, технических вод (открытых и закрытых систем технологического водоснабжения), технологических растворов, модельных растворов, водных вытяжек (из материалов, используемых в системах водоснабжения, из продукции, изготовленной из полимерных материалов, из укупорочных материалов, из продукции текстиля, меха и кожи, из материалов, используемых для изготовления игрушек и прочей продукции, изготовленной из полимерных материалов).

Диапазон измерений массовых концентраций формальдегида составляет от 0,002 до 0,2 мг/дм³ и массовых концентраций ацетальдегида - от 0,005 до 0,25 мг/дм³.

Примечание - Продолжительность анализа одной пробы не менее 3-х часов, серии из 10 проб - 8 часов.

Блок-схема выполнения анализа приведена в приложении А.

2 НОРМАТИВНЫЕ ССЫЛКИ

ГОСТ 8.135-2004 Государственная система обеспечения единства измерений. Стандарт-титры для приготовления буферных растворов - рабочих эталонов pH 2-го и 3-го разрядов. Технические и метрологические характеристики. Методы их определения.

ГОСТ 12.0.004-2015 Система стандартов безопасности труда. Организация обучения безопасности труда. Общие положения.

ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования.

ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности.

ГОСТ 12.4.009-83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание.

ГОСТ 17.1.5.05-85 Охрана природы. Гидросфера. Общие требования к отбору проб поверхностных и морских вод, льда и атмосферных осадков.

ГОСТ 1770-74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия.

ГОСТ 4166-76 Реактивы. Натрий сернокислый. Технические условия.

ГОСТ 4233-77 Реактивы. Натрий хлористый. Технические условия.

ГОСТ 4328-77 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия.

ГОСТ 5556-81 Вата медицинская гигроскопическая. Технические условия.

ГОСТ 22648-77 Пластмассы. Методы определения гигиенических показателей.

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры.

ГОСТ 27068-86 Реактивы. Натрий серноватистокислый (натрия тиосульфат) 5-водный. Технические условия.

ГОСТ 31861-2012 Вода. Общие требования к отбору проб.

ГОСТ Р 12.1.019-2009. Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты.

ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002. Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике.

ГОСТ OIML R 76-1-2011 Государственная система обеспечения единства измерений. Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания.

ГОСТ Р 52501-2005 Вода для лабораторного анализа. Технические условия.

ГОСТ Р 53228-2008 Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания.

ГОСТ Р 56237-2014 Вода питьевая. Отбор проб на станциях водоподготовки и в трубопроводных распределительных системах.

МУ 2.1.4.2898-11 Методические указания. Санитарно-эпидемиологические исследования (испытания) материалов, реагентов и оборудования, используемых для водоочистки и водоподготовки.

МУК 4.1/4.3.2038-05 Методы контроля. Химические факторы/физические факторы. Санитарно-эпидемиологическая оценка игрушек. Методические указания.

ТУ 6-09-2662-77 Метилен хлористый (дихлорметан) для хроматографии химически чистый.

Примечание - Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 ПРИПИСАННЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ТОЧНОСТИ ИЗМЕРЕНИЙ

Настоящая методика обеспечивает получение результатов измерений с погрешностью, не превышающей значений, приведенных в таблице 1.

Таблица 1 - Значения показателей повторяемости, воспроизводимости и точности

4 МЕТОД ИЗМЕРЕНИЙ

Метод измерений массовых концентраций формальдегида и ацетальдегида основан на взаимодействии этих соединений с 2,4-динитрофенилгидразином, экстракции полученных продуктов реакции хлористым метиленом, упаривании экстракта на ротационном испарителе и анализе экстракта методом ВЭЖХ с УФ-детектором.

Массовую концентрацию вещества в пробе рассчитывают с использованием градуировочной характеристики, описывающей зависимость площади хроматографического пика от содержания вещества в градуировочном растворе.

5 СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ, ВСПОМОГАТЕЛЬНЫЕ УСТРОЙСТВА.
РЕАКТИВЫ И МАТЕРИАЛЫ

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы, стандартные образцы и вещества гарантированной чистоты.

5.1 Средства измерений, вспомогательные устройства

5.1.1 Весы лабораторные общего назначения специального или высокого класса точности, с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ OIML R 76-1 или по ГОСТ Р 53228.

5.1.2 pH-метр с магнитной мешалкой, например pH 673М.

5.1.3 Система хроматографическая, например «Agilent 1100», «Agilent 1200», «Agilent 1260» фирмы «Agilent Technologies» (США) или «Series 200» фирмы «Perkin Elmer» (США) в комплекте:

- Насос высокого давления на 2 или 4 элюента.

- Детектор на диодной матрице или УФ-детектор.

- Дегазатор вакуумный для дегазирования элюентов.

- Устройство для автоматического отбора и ввода проб (автосэмплер), позволяющее вводить (5 - 30) мм³ пробы.

- Колонка хроматографическая металлическая с фазой на основе силикагеля с привитыми группами С18 размером 150×4,6 мм, зернением 5 мкм, например «Hypersil Green РАН» фирмы «Shandon HPLC» (США).

5.1.4 Установка для получения деионизированной воды 2 степени чистоты, например «Millipore Elix».

Примечание - Для получения деионизированной воды необходимого качества рекомендуется использовать устройство для дополнительной очистки воды.

5.1.5 Испаритель ротационный, позволяющий регулировать температуру водяной бани (от 30 °С до 100 °С) и скорость вращения колбы для упаривания, снабженный водоструйным насосом для создания умеренного вакуума, например «Rotavapor 114» фирмы «Buchi» (Германия) или любой другой.

5.1.6 Компьютер персональный, позволяющий работать с программным обеспечением для управления хроматографом, сбора информации и обработки результатов.

5.1.7 Принтер любой марки.

5.1.8 Устройство для встряхивания емкостей с жидкостью любого типа, например шюттель-аппарат на 5 мест для делительных воронок вместимостью 1 дм³ фирмы «Agitelec», каталог «Fisher Lab».

5.1.9 Форколонка с картриджем размером 15×3,2 мм с сорбентом на основе силикагеля с привитыми группами С18, зернением 7 мкм, например фирмы «Perkin Elmer».

5.1.10 Холодильник двухкамерный бытовой, обеспечивающий температуру холодильной камеры (2 - 10) °С и морозильной камеры минус (12 - 24) °С.

5.2 Лабораторная посуда

5.2.1 Воронки для фильтрования В-75-110 ХС по ГОСТ 25336.

5.2.2 Воронки делительные ВД-3-1000 ХС по ГОСТ 25336.

5.2.3 Колбы мерные вместимостью 10; 500 и 1000 см³ по ГОСТ 1770, класс точности 2.

5.2.4 Колбы круглодонные с притертыми пробками вместимостью 1 дм³ К-1000-29/32 ТХС по ГОСТ 25336.

5.2.5 Колбы грушевидные со шлифом вместимостью 100 см³ Гр-100-29/32 ТХС по ГОСТ 25336.

5.2.6 Мензурки вместимостью 250 и 500 см³ по ГОСТ 1770, класс точности 2.

5.2.7 Микрошприцы вместимостью 0,010; 0,025; 0,050; 0,25; 0,50 и 1,0 см³, например фирмы «Hamilton».

5.2.8 Пипетки градуированные вместимостью 2; 5 и 25 см³ по ГОСТ 29227, класс точности 2.

5.2.9 Стакан вместимостью 1000 см³ по ГОСТ 25336.

5.2.10 Флаконы стеклянные, герметично закрывающиеся завинчивающимися крышками вместимостью (1,5 - 2) см³ и (5 - 7) см³, снабженные прокладками с тефлоновым покрытием.

5.2.11 Цилиндр мерный вместимостью 100 см³ по ГОСТ 1770, класс точности 2.

5.3 Реактивы и материалы

5.3.1 Ацетонитрил для градиентной хроматографии, например фирмы «Merck» или «Aeros».

5.3.2 Вода деионизированная с содержанием формальдегида не более 1,5 мкг/дм³ и ацетальдегида не более 4 мкг/дм³ (далее - вода деионизированная).

Примечание - Для приготовления растворов допускается использовать воду питьевую расфасованную в емкости из подземных источников, не содержащую формальдегид и ацетальдегид, например минеральную воду «Evian» (Франция).

5.3.3 2,4-динитрофенилгидразин, с содержанием основного вещества не менее 98 %, например фирмы «Sigma-Aldrich» или «Aeros».

5.3.4 Гидрофталат калия (KНС₈Н₄О₄), стандарт-титр 0,05 моль/кг (рН = 4,01 ед. рН) по ГОСТ 8.135.

5.3.5 Метилен хлористый, х.ч. по ТУ 6-09-2662.

5.3.6 Натрий гидроокись (гидроксид натрия), х.ч. по ГОСТ 4328.

5.3.7 Натрий серноватистокислый (натрия тиосульфат), ч.д.а. по ГОСТ 27068.

5.3.8 Натрий сернокислый (натрия сульфат, Na₂SО₄) безводный, ч.д.а. по ГОСТ 4166.

5.3.9 Натрий хлористый (натрия хлорид), х.ч. по ГОСТ 4233.

5.3.10 Метанол для жидкостной хроматографии по ТУ 6-09-14-2192 или для спектроскопии, например фирмы «Merck» (Германия).

5.3.11 Бумага индикаторная универсальная, позволяющая измерять pH в диапазоне от 4 до 6 ед. pH с шагом 0,5 ед. pH.

5.3.12 Вата медицинская хирургическая хлопковая по ГОСТ 5556.

5.4 Стандартные образцы. Аттестованные растворы. Вещества гарантированной чистоты

5.4.1 Стандартный образец формальдегида (СО) в виде водного раствора с массовой концентрацией 1 мг/см³ с относительной погрешностью аттестованного значения не более 4 %.

5.4.2 Ацетальдегид - вещество гарантированной чистоты с содержанием основного вещества не менее 98 %, например фирмы «Dr. Ehrenstorfer» или любой другой.

Примечания -

1 Допускается использование утвержденных типов средств измерений любых производителей, обеспечивающих получение результатов измерений с установленной точностью.

2 Допускается использование оборудования, материалов и реактивов с характеристиками, не хуже, чем у вышеуказанных, в том числе импортных.

6 УСЛОВИЯ БЕЗОПАСНОГО ПРОВЕДЕНИЯ РАБОТ

6.1 При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007.

6.2 При работе с оборудованием необходимо соблюдать правила электробезопасности по ГОСТ Р 12.1.019.

6.3 Обучение работающих безопасности труда должно быть организовано в соответствии с ГОСТ 12.0.004.

6.4 Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009.

6.5 Отработанные реактивы, растворы, материалы и пробы должны утилизироваться в соответствии с действующими в лаборатории процедурными документами.

7 ТРЕБОВАНИЯ К КВАЛИФИКАЦИИ ОПЕРАТОРА

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица, имеющие среднее специальное или высшее образование химического профиля, владеющие методом хроматографического анализа, знающие конструкцию, принцип действия и правила эксплуатации данного оборудования.

К выполнению работ по пробоподготовке допускаются лица, имеющие среднее специальное образование химического профиля, обученные методике подготовки пробы для хроматографического анализа.

8 УСЛОВИЯ ВЫПОЛНЕНИЯ ИЗМЕРЕНИЙ

При выполнении измерений в лаборатории должны быть соблюдены следующие условия:

температура воздуха	(20 - 28) °С
относительная влажность воздуха	не более 80 % при 25 °С

9 ОТБОР И ХРАНЕНИЕ ПРОБ

9.1 Отбор проб воды осуществляют в соответствии с ГОСТ 31861 и ГОСТ Р 56237 в стеклянные герметично закупоривающиеся флаконы из темного стекла с притертыми пробками или с крышками из полипропилена (или другой пластмассы, не содержащей формальдегид и ацетальдегид). Недопустимо использовать крышки, изготовленные из феноло-формальдегидных смол. Флаконы заполняют пробой воды до пробки. Объем отбираемой пробы должен быть не менее 0,5 дм³.

Водные вытяжки готовят в соответствии с требованиями, установленными нормативными документами на исследуемый объект.

9.2 Пробу питьевой воды, содержащую остаточный хлор, консервируют на месте отбора, добавляя тиосульфат натрия из расчета (80 ± 10) мг на 1 дм³ пробы.

9.3 Отобранную пробу допускается хранить до начала анализа в течение суток с момента отбора без принудительного охлаждения и консервации. Вытяжку анализируют в течение суток с момента приготовления. Если такой возможности нет, то проба воды (или вытяжка) может дополнительно храниться при температуре (2 - 10) °С в течение 3 суток.

9.4 При отборе проб составляется сопроводительный документ, в котором указывается:

- место, дата и время отбора;

- номер пробы;

- должность, фамилия сотрудника, отбирающего пробу.

9.5 Отбор продукции

Отбор продукции осуществляется в соответствии с требованиями, установленными для данного объекта исследований. Пробы должны быть упакованы для обеспечения сохранности продукции. До проведения анализа образцы продукции хранятся при комнатной температуре.

9.6 Отработанные реактивы, растворы, материалы и пробы должны утилизироваться в соответствии с действующими в лаборатории процедурными документами.

10 ПОДГОТОВКА К ВЫПОЛНЕНИЮ ИЗМЕРЕНИЙ

10.1 Подготовка аппаратуры

Подготовку хроматографической системы и компьютера к работе проводят в соответствии с инструкцией по эксплуатации. На компьютере в программе управления создают метод анализа с использованием абсолютной градуировки согласно руководству по эксплуатации программного обеспечения. В качестве элюентов используют элюент А и элюент В, которые представляют собой, соответственно, деионизированную воду и ацетонитрил.

Для удаления растворенных газов (кислорода и др.) из растворителей применяют вакуумный дегазатор.

Ввод пробы в колонку осуществляют с помощью автоматического пробоотборника.

Хроматографическую систему включают в соответствии с инструкцией по эксплуатации и выводят на режим при следующих условиях.

Рекомендуемые параметры работы хроматографической системы:

Объем вводимой пробы	(5 - 10) мм3
Скорость элюирования	(1 - 1,2) см3/мин

Регистрация поглощения производится на длине волны 356 нм при ширине спектральной полосы 4 нм.

Хроматографирование проводится в градиентном режиме по программе, описанной в табл. 2.

Таблица 2 - Программа работы градиентного насоса

Примечание - Допускается изменять параметры хроматографического анализа в зависимости от перечня определяемых веществ и используемой хроматографической колонки.

10.2 Приготовление реактивов

10.2.1 Проверка чистоты метилена хлористого

Проверку чистоты каждой партии метилена хлористого осуществляют хроматографическим методом. Для этого 10 см³ метилена хлористого помещают в колбу ротационного испарителя вместимостью 100 см³ и упаривают досуха при температуре (50 - 60) °С. По окончании упаривания к сухому остатку добавляют 1 см³ ацетонитрила и оставляют на (5 - 10) мин в колбе для растворения остатка. Затем раствор переливают во флакон вместимостью 2 см³, герметично закрывают и анализируют в условиях хроматографирования пробы. На хроматограмме не должны присутствовать пики, мешающие определению формальдегида и ацетальдегида.

10.2.2 Раствор гидроксида натрия молярной концентрации 0,1 моль/дм³

В мерную колбу вместимостью 500 см³, содержащую (200 - 300) см³ деионизированной воды, помещают (2,0 ± 0,1) г гидроксида натрия, перемешивая стеклянной палочкой до полного растворения. После остывания доводят объем раствора до 500 см³ деионизированной водой. Раствор хранят не более 6 месяцев при комнатной температуре.

10.2.3 Раствор 2,4-динитрофенилгидразина массовой концентрации 3 мг/см³

В мерную колбу вместимостью 500 см³, содержащую (200 - 300) см³ ацетонитрила, вносят (2,25 ± 0,05) г 2,4-динитрофенилгидразина, растворяют и доводят объем раствора до метки ацетонитрилом. Раствор хранят не более 6 месяцев в холодильнике при температуре (2 - 10) °С.

10.2.4 Раствор гидрофталата калия молярной концентрации 0,1 моль/дм³

Вскрывают ампулу со стандарт-титром и переносят ее содержимое в мерную колбу вместимостью 500 см³, в которую предварительно наливают (200 - 300) см³ деионизированной воды. После растворения гидрофталата калия доводят объем раствора до метки деионизированной водой. Раствор хранят не более 3 месяцев в холодильнике при температуре (2 - 10) °С.

10.2.5 Раствор фталатного буфера

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 500 см³ раствора гидрофталата калия молярной концентрации 0,1 моль/дм³, добавляют 180 см³ раствора гидроксида натрия и после перемешивания доводят объем раствора до метки деионизированной водой. Содержимое колбы переливают в стакан, кладут в стакан магнитную мешалку и при перемешивании проводят измерение значения pH, которое должно быть равно (5,0 ± 0,5) ед. pH. Если значение pH менее 4,5 ед. pH, то в стакан по каплям добавляют раствор гидроксида натрия молярной концентрации 0,1 моль/дм³ и доводят значение pH буфера до необходимого. Раствор хранят не более 3 месяцев в холодильнике при температуре (2 - 10) °С.

10.3 Приготовление градуировочных растворов

10.3.1 Основной градуировочный раствор формальдегида массовой концентрации 1000 мг/дм³

В качестве основного градуировочного раствора формальдегида используют СО с массовой концентрацией 1000 мг/дм³ формальдегида в воде. СО состава раствора формальдегида после вскрытия ампулы хранят не более 3 месяцев в холодильнике при температуре (2 - 10) °С в герметично закрытом флаконе.

10.3.2 Промежуточный градуировочный раствор формальдегида массовой концентрации 100 мг/дм³

Промежуточный градуировочный раствор формальдегида в воде с массовой концентрацией 100 мг/дм³ готовят из СО. Для этого 1 см³ СО помещают в мерную колбу вместимостью 10 см³ и доводят объем раствора до мелей деионизированной водой.

Промежуточный градуировочный раствор формальдегида хранят не более 3 месяцев в холодильнике при температуре (2 - 10) °С в герметично закрытой колбе. Перед использованием раствор выдерживают при комнатной температуре не менее 20 минут.

10.3.3 Основной градуировочный раствор ацетальдегида массовой концентрации 1000 мг/дм³

Основной градуировочный раствор ацетальдегида в метаноле с массовой концентрацией 1000 мг/дм³ готовят из чистого вещества. Для этого (10,0 ± 0,2) мг ацетальдегида помещают в мерную колбу вместимостью 10 см³ и доводят объем раствора до метки метанолом.

10.3.4 Промежуточный градуировочный раствор ацетальдегида в метаноле массовой концентрации 100 мг/дм³

Промежуточный градуировочный раствор ацетальдегида в метаноле с массовой концентрацией 100 мг/дм³ готовят из основного градуировочного раствора с массовой концентрацией 1000 мг/дм³. Для этого 1 см³ основного градуировочного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 10 см³ и доводят объем раствора до метки метанолом.

Основной и промежуточный градуировочные растворы ацетальдегида хранят не более 3 месяцев в морозильной камере холодильника при температуре минус (12 - 24) °С в герметично закрытой колбе. Перед использованием раствор выдерживают при комнатной температуре не менее 20 минут.

10.3.5 Градуировочные растворы формальдегида и ацетальдегида

Градуировку хроматографа проводят по шести градуировочным растворам: С₀, С₁, С₂, С₃, С₄ и С₅. В качестве С₀ используют холостую пробу, представляющую собой деионизированную воду.

Градуировочные растворы формальдегида и ацетальдегида С₁, С₂, С₃, С₄ и С₅ (табл. 3) готовят непосредственно перед использованием из промежуточных градуировочных растворов. Для этого в мерные колбы вместимостью 500 см³, содержащие по 300 - 400 см³ деионизированной воды, помещают последовательно необходимые количества промежуточных растворов формальдегида и ацетальдегида (табл. 3) и доводят объемы растворов в колбах до метки деионизированной водой.

Таблица 3 - Приготовление градуировочных растворов формальдегида и ацетальдегида в мерных колбах вместимостью 500 см³

Примечание - Допускается использовать градуировочные растворы с другими массовыми концентрациями определяемых веществ, но в пределах их диапазонов измерений, с корректировкой схемы приготовления градуировочных растворов.

10.4 Установление градуировочных характеристик

Градуировку хроматографа проводят в условиях выполнения измерений. При этом для каждого градуировочного раствора (табл. 3) и холостой пробы (в качестве холостой пробы используется деионизированная вода) проводят пробоподготовку (11.2). Полученный экстракт хроматографируют в тот же день, если такой возможности нет, то экстракт (раствор, содержащий продукты взаимодействия формальдегида и ацетальдегида с 2,4-динитрофенилгидразином в ацетонитриле) хранят в морозильной камере при температуре минус (12 - 24) °С не более 1 месяца. Перед измерением экстракт тщательно перемешивают. Экстракты, хранившиеся в морозильной камере, перед анализом необходимо выдержать при комнатной температуре не менее 20 минут.

В программе управления выбирают режим измерения факторов отклика по методу абсолютной градуировки.

Каждый экстракт градуировочного раствора и экстракт холостой пробы хроматографируют дважды при условиях, указанных в п. 10.1, рассчитывая среднее значение площади пика определяемого соединения (S_i) для каждого из растворов. Затем с помощью программного модуля градуировки управляющей программы для каждого соединения устанавливают градуировочную характеристику (A_i) с учетом площади пика определяемого соединения в холостой пробе. Полученное значение A_i используют для расчета результата измерения.

Установление градуировочных характеристик проводят не реже одного раза в 6 месяцев, а также при смене хроматографической колонки или после ремонта оборудования, повлекшего за собой изменение условий хроматографирования.

Пример типичной хроматограммы продуктов взаимодействия формальдегида и ацетальдегида с 2,4-динитрофенилгидразином представлен в приложении Б.

10.5 Контроль стабильности градуировочной характеристики

Проверку стабильности градуировочных характеристик проводят для каждой серии проб по результатам анализа экстракта градуировочного раствора С₃. Градуировочную характеристику считают стабильной в случае, если полученное значение массовой концентрации вещества отличается от заданного значения массовой концентрации в градуировочном растворе не более чем на 25 %, а время удерживания в градуировочном растворе отклоняется от установленного при градуировке времени удерживания не более чем на 0,2 мин.

Примечание - Допускается проверять стабильность градуировочной характеристики только по формальдегиду.

Компоненты идентифицируют по абсолютным временам удерживания и, при наличии детектора с диодной матрицей, по спектрам поглощения (см. приложение В).

Если условие стабильности градуировочной характеристики не выполняется для одного из градуировочных растворов, необходимо выполнить повторный анализ этого градуировочного раствора с целью исключения результата измерения, содержащего грубую погрешность.

Если градуировочная характеристика нестабильна, выясняют и устраняют причины нестабильности и повторяют контроль с использованием других образцов для градуировки, предусмотренных методикой. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики строят новый градуировочный график.

11 ВЫПОЛНЕНИЕ ИЗМЕРЕНИЙ

При измерении массовых концентраций формальдегида и ацетальдегида выполняют следующие операции.

11.1 Подготовка аппаратуры

Хроматографическую систему выводят на режим в соответствии с условиями, указанными в п. 10.1. На компьютере в программе управления активируют метод анализа.

11.2 Подготовка вытяжки

Вытяжки и модельные растворы готовят в соответствии с нормативными документами, регламентирующими подготовку продукции к испытаниям. Например, по МУК 4.1/4.3.2038 готовят водные вытяжки при оценке безопасности игрушек; для материалов, используемых в системах водоснабжения, водные вытяжки готовят по МУ 2.1.4.2898. Далее выполняют операции по п. 11.3.

11.3 Подготовка пробы

Отмеряют мензуркой 500 см³ пробы воды и пипеткой добавляют 20 см³ фтапатного буфера. С помощью индикаторной бумаги проверяют значение pH и при необходимости к пробе добавляют дополнительное количество фталатного буфера до тех пор, пока pH пробы не достигнет нужного значения (5,0 ± 0,5) ед. pH.

Содержимое мензурки переносят в круглодонную колбу вместимостью 1 дм³, пипеткой добавляют 5 см³ раствора 2,4-динитрофенилгидразина и помещают колбу в водяную баню ротационного испарителя (термостат ротационного испарителя предварительно должен быть нагрет до температуры (50 - 55) °С. Включают перемешивающее устройство ротационного испарителя (10 - 30) оборотов в минуту и проводят реакцию с 2,4-динитрофенилгидразином при температуре (50 - 55) °С в течение 1 часа. (Вакуумный насос ротационного испарителя на этой стадии не используют).

Затем содержимое круглодонной колбы переносят в делительную воронку вместимостью 1 дм³, после охлаждения до комнатной температуры добавляют цилиндром 60 см³ метилена хлористого и (30 - 40) г хлористого натрия, закрывают воронку притертой пробкой, несколько раз интенсивно встряхивают, открывая периодически кран воронки, чтобы выпустить пары метилена хлористого. Делительную воронку устанавливают в кольцо шюттель-аппарата, закрепляют держателем и включают шюттель-аппарат на 20 мин со скоростью (60 - 80) встряхиваний в минуту. После остановки шюттель-аппарата делительную воронку оставляют в покое до полного разделения слоев (10 - 15) мин. Экстракт пропускают через коническую воронку заполненную на (1,5 - 2) см безводным сульфатом натрия (на дно воронки кладут кусочек ваты, чтобы сульфат натрия не высыпался). Экстракт собирают в грушевидную колбу вместимостью 100 см³. Сульфат натрия промывают (5 - 10) см³ метилена хлористого, смыв добавляют в экстракт.

Упаривание экстракта проводят на ротационном испарителе при температуре (50 - 55) °С под вакуумом, создаваемым водоструйным насосом. (Скорость вращения ротационного испарителя (10 - 30) оборотов в минуту). Экстракт упаривают досуха. По окончании упаривания к сухому остатку добавляют 1 см³ ацетонитрила и оставляют на (5 - 10) мин в колбе для растворения продуктов реакции. Затем экстракт перепивают во флакон вместимостью 2 см³ и герметично закрывают.

11.4 Проведение измерений

При невозможности проведения анализа в тот же день экстракты хранят в герметично закрытых флаконах в морозильной камере при температуре минус (12 - 24) °С не более месяца. Экстракты, хранившиеся в морозильной камере, перед анализом выдерживают при комнатной температуре не менее 20 минут.

Продукты взаимодействия формальдегида и ацетальдегида с 2,4-динитрофенилгидразином идентифицируют по абсолютным временам удерживания (п. 10.3). В случае, когда массовая концентрация определяемого соединения в пробе выше, чем максимальная массовая концентрация в градуировочном растворе, экстракт следует разбавить ацетонитрилом и провести хроматографический анализ разбавленного экстракта. При вычислении результатов измерений необходимо учесть степень разбавления.

При наличии детектора с диодной матрицей правильность определения обнаруженного соединения подтверждают идентификацией пиков по УФ-спектрам (приложение В).

При смене партии реактивов проводят проверку реактивов на присутствие определяемых веществ в холостой пробе. Содержание альдегидов в холостой пробе не должно превышать пределы определения. Для этого 500 см³ деионизированной воды (5.3.2) подвергают процедуре подготовки пробы по п. 11.3. и выполняют измерение.

12 ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ

Обработку результатов измерений массовых концентраций формальдегида и ацетальдегида выполняют с помощью управляющей программы компьютера в соответствии с градуировочной характеристикой по формуле:

(1)

где

X_i - массовая концентрация определяемого i-гo соединения в пробе, мг/дм³;

S_i - площадь пика определяемого i-гo соединения в анализируемом экстракте, мВ∙с;

А_i - относительный градуировочный коэффициент определяемого i-гo соединения, мВ∙с∙дм³/мг;

b_i - площадь пика определяемого i-гo соединения в холостой пробе, полученная при построении градуировочной характеристики, мВ∙с.

13 ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ

Результаты измерений, как правило, в протоколах исследований представляют в виде:

Х_i ± Δ_i,

где - характеристика абсолютной погрешности результатов измерений определяемого i-гo соединения, которую рассчитывают по формуле

Δi = 0,01∙δi∙Xi,

(2)

где δ_i - значение показателя точности определяемого i-гo соединения, % (таблица 1).

Результаты измерений при занесении в протокол исследований округляют с точностью до:

при массовой концентрации

от 0,002 до 0,01 мг/дм3 включ.	- 0,0001 мг/дм3;
св. 0,01 до 0,10 мг/дм3 включ.	- 0,001 мг/дм3;
св. 0,10 до 0,25 мг/дм3 включ.	- 0,01 мг/дм3.

14 ПРОВЕРКА ПРИЕМЛЕМОСТИ РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ

14.1 При получении двух результатов измерений (X_1i, X_2i) в условиях повторяемости (сходимости) осуществляют проверку приемлемости результатов в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО 5725-6 (раздел 5).

Результат измерений считают приемлемым при выполнении условия:

(3)

Значения пределов повторяемости (r_i) приведены в таблице 4.

При выполнении условия (3) приемлемы оба результата измерений, и в качестве окончательного используют среднее арифметическое значение результатов двух измерений. При превышении предела повторяемости используют методы проверки приемлемости результатов измерений согласно разделу 5 ГОСТ Р ИСО 5725-6.

14.2 При получении результатов измерений в двух лабораториях (X_лаб1i, Х_лаб2i) проводят проверку приемлемости результатов измерений в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО 5725-6 (раздел 5).

Результат измерений считают приемлемым при выполнении условия:

(4)

Значения пределов воспроизводимости (R_i) приведены в таблице 4.

При выполнении условия (4) приемлемы оба результата измерений, и в качестве окончательного используют среднее арифметическое значение результатов двух измерений. При превышении предела воспроизводимости используют методы проверки приемлемости результатов измерений согласно разделу 5 ГОСТ Р ИСО 5725-6.

15 КОНТРОЛЬ ТОЧНОСТИ РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ

15.1 В случае регулярного выполнения измерений по методике рекомендуется проводить контроль стабильности результатов измерений путем контроля среднеквадратического отклонения повторяемости, среднеквадратического отклонения внутрилабораторной прецизионности и погрешности с помощью контрольных карт в соответствии с рекомендациями ГОСТ Р ИСО 5725-6 (раздел 6).

Образец для контроля готовят с использованием СО или вещества гарантированной чистоты. Периодичность контроля регламентируют во внутренних документах лаборатории.

15.2 Оперативный контроль точности результатов измерений рекомендуется проводить с каждой серией проб, если анализ по методике выполняется эпизодически, а также при возникновении необходимости подтверждения результатов анализа отдельных проб (при получении нестандартного результата измерений; результата, превышающего ПДК и т.п.). В качестве образцов для контроля используют образец, приготовленный с использованием СО или вещества гарантированной чистоты.

Оперативный контроль процедуры измерений проводят путем сравнения результата отдельно взятой контрольной процедуры (K_кi) с нормативом контроля (K_i).

Результат контрольной процедуры K_кi (мг/дм³) рассчитывают по формуле

Kкi = |Xi - Ci|,

(5)

где

X_i - результат контрольного измерения массовой концентрации определяемого i-гo соединения в образце для контроля, мг/дм³;

C_i - заданное значение массовой концентрации определяемого i-гo соединения в образце для контроля, мг/дм³.

Норматив контроля K_i (мг/дм³) рассчитывают по формуле

Ki = Δлi,

(6)

где Δ_лi - характеристика абсолютной погрешности заданного значения массовой концентрации определяемого i-гo соединения в образце для контроля, установленная в лаборатории при реализации методики, мг/дм³.

Примечание - Допускается Δ_лi рассчитывать по формуле

Δлi = 0,84∙Δi,

(7)

где Δ_i - приписанная характеристика абсолютной погрешности методики измерений, рассчитанная по формуле (2) для заданного значения массовой концентрации определяемого i-гo соединения в образце для контроля, мг/дм³.

Результат контрольной процедуры признают удовлетворительным при выполнении условия:

Kкi ≤ Ki.

(8)

При невыполнении условия контрольную процедуру повторяют. При повторном невыполнении условия выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

Таблица 4 - Относительные значения пределов повторяемости и воспроизводимости при доверительной вероятности 0,95

ПРИЛОЖЕНИЕ А

БЛОК-СХЕМА ПРОВЕДЕНИЯ АНАЛИЗА

ПРИЛОЖЕНИЕ Б

Пример типичной хроматограммы модельного раствора

1 - продукт взаимодействия формальдегида с 2,4-динитрофенилгидразином

2 - продукт взаимодействия ацетальдегида с 2,4-динитрофенилгидразином

__________

^* Массовая концентрация формальдегида и ацетальдегида в модельном растворе составляла 0,005 мг/дм³. Раствор приготовлен с использованием минеральной воды «Evian».

ПРИЛОЖЕНИЕ В

Спектры поглощения продуктов взаимодействия формальдегида (1)
и ацетальдегида (2) с 2,4-динитрофенилгидразином

Содержание