4.1. Методы контроля. Химические факторы

МЕТОДИКА ИЗМЕРЕНИЙ
МАССОВОЙ ДОЛИ 2-(2,4-ДИНИТРОФЕНОКСИ)ЭТАНОЛА
В ПРОБАХ ПОЧВЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ
ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Методические указания по методам контроля
МУК 4.1.023-18

Регистрационный номер по Федеральному реестру в Федеральном информационном
фонде по обеспечению единства измерений ВНИИМС
ФР.1.31.2017.28329

Федеральное медико-биологическое агентство
Москва 2017

Предисловие

1. Методические указания разработаны Федеральным государственным унитарным предприятием «Научно-исследовательский институт гигиены, токсикологии и профпатологии» Федерального медико-биологического агентства (ФГУП «НИИ ГТП» ФМБА России, г. Волгоград). Разработчики: Вехтер Е.П., Деменкова Е.А., Коренькова Т.Б., Кириченко Ю.В.

2. Методика измерений массовой доли 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в пробах почвы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии аттестована в соответствии с Федеральным законом от 26 июня 2008 года № 102-ФЗ «Об обеспечении единства измерений» и с ГОСТ Р 8.563-2009 Федеральным государственным унитарным предприятием «Уральский Научно-исследовательский институт метрологии», Государственным научным метрологическим институтом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии. Свидетельство об аттестации методики измерений № 222.0210/RA.RU.311866/2017 от 27.07.2017 г.

3. Рекомендованы к утверждению подкомиссией по специальному нормированию Федерального медико-биологического агентства (протокол от 4 апреля 2018 г. № 03/2018).

4. Утверждены и введены в действие Заместителем руководителя ФМБА России, Главным государственным санитарным врачом по обслуживаемым организациям и обслуживаемым территориям В.В. Романовым 4 апреля 2018 г.

5. Введены впервые.

Федеральный закон от 30.03.1999 № 52-ФЗ
«О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения»

«Санитарно-эпидемиологические требования - обязательные требования к обеспечению безопасности и (или) безвредности для человека факторов среды обитания, условий деятельности юридических лиц и граждан, в том числе индивидуальных предпринимателей, используемых ими территорий, зданий, строений, сооружений, помещений, оборудования, транспортных средств, несоблюдение которых создаёт угрозу жизни или здоровью человека, угрозу возникновения и распространения заболеваний и которые устанавливаются государственными санитарно-эпидемиологическими правилами и гигиеническими нормативами (далее - санитарные правила), а в отношении безопасности продукции и связанных с требованиями к продукции процессов её производства, хранения, перевозки, реализации, эксплуатации, применения (использования) и утилизации, которые устанавливаются документами, принятыми в соответствии с международными договорами Российской Федерации, и техническими регламентами» (статья 1).

«Соблюдение санитарных правил является обязательным для граждан, индивидуальных предпринимателей и юридических лиц» (статья 39).

«За нарушение санитарного законодательства устанавливается дисциплинарная, административная и уголовная ответственность в соответствии с законодательством Российской Федерации» (статья 55).

Содержание

 

4.1. Методы контроля. Химические факторы

МЕТОДИКА ИЗМЕРЕНИЙ
МАССОВОЙ ДОЛИ 2-(2,4-ДИНИТРОФЕНОКСИ)ЭТАНОЛА
В ПРОБАХ ПОЧВЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ
ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Методические указания по методам контроля
МУК 4.1.023-18

1. Назначение и область применения

Настоящий документ устанавливает методику измерений массовой доли 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в пробах почвы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в диапазоне измерений от 0,5 до 10,0 мг/кг.

Методика разработана и предназначена для специалистов промышленно-санитарных лабораторий и центров гигиены и эпидемиологии, осуществляющих санитарно-химический контроль загрязнения 2-(2,4-динитрофенокси)этанолом почвы в районах производства и использования 2-(2,4-динитрофенокси)этанола.

Методика может быть использована в других аккредитованных лабораториях, специализирующихся на проведении аналогичных исследований, после подтверждения соответствия процедуры измерений при реализации методики установленным требованиям согласно Р 50.2.060-2008 [1].

2-(2,4-Динитрофенокси)этанол. Синонимы: Бета-(2,4-динитрофенокси)этанол, моно-2,4-динитрофениловый эфир этиленгликоля.

Брутто-формула: C₈H₈N₂O₆.

Структурная формула:

Молекулярная масса: 228,16 а.е.м.

2-(2,4-Динитрофенокси)этанол - белое кристаллическое вещество с желтоватым оттенком. Является пластификатором для ацетата целлюлозы. Входит в состав бронирующих материалов для зарядов твердых ракетных топлив [2].

Пыль 2-(2,4-динитрофенокси)этанола с размером 70 микрон и влажностью 0,5 % в состоянии аэровзвеси имеет нижний концентрационный предел взрываемости 34,4 г/м³ и относится к взрывоопасным продуктам.

2-(2,4-Динитрофенокси)этанол относится к твердым горючим веществам. Температура плавления 2-(2,4-динитрофенокси)этанола 110 - 113 °С, плавится с разложением. Температура воспламенения 245 °С, температура самовоспламенения 275 °С. Плотность составляет 1,5 г/см³.

2-(2,4-Динитрофенокси)этанол легко растворим в горячей воде, спирте, бензоле, диэтиловом эфире, ацетонитриле. Давление паров при 25 °С составляет 1,65×10^-8 мм рт.ст.

Разлагается при взаимодействии с щелочами. Не устойчив при воздействии солнечного света [3].

Нижний предел измерений массовой доли 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в пробах почвы составляет 0,5 мг/кг (5,0×10^-7 г/г).

Диапазон измерений массовой доли 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в пробах почвы составляет от 0,5 до 10,0 мг/кг (от 5,0×10^-7 до 1,0×10^-5 г/г).

Продолжительность анализа составляет 1 час 45 мин.

2. Нормативные ссылки

В настоящей методике использованы ссылки на следующие нормативные документы:

Приказ Минздравсоцразвития России от 12.04.2011 № 302н «Об утверждении перечней вредных и (или) опасных производственных факторов и работ, при выполнении которых проводятся обязательные предварительные и периодические медицинские осмотры (обследования), и Порядка проведения обязательных предварительных и периодических осмотров (обследований) работников, занятых на тяжелых работах и на работах с вредными и (или) опасными условиями труда».

ГОСТ 6709-72. Вода дистиллированная. Технические условия.

ГОСТ 1770-74. Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия.

ГОСТ 12.1.010-76. Система стандартов безопасности труда. Взрывобезопасность. Общие требования.

ГОСТ 9147-80. Посуда и оборудование лабораторные фарфоровые. Технические условия.

ГОСТ 25336-82. Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры.

ГОСТ 12.4.009-83. Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание.

ГОСТ 17.4.3.01-83. Охрана природы. Почва. Общие требования к отбору проб.

ГОСТ 17.4.4.02-84. Охрана природы. Почвы. Методы отбора и подготовки проб для химического, бактериологического, гельминтологического анализа.

ГОСТ 29227-91. Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования.

ГОСТ 12.1.004-91. Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования.

ГОСТ Р 51477-99. Тара стеклянная для химических реактивов и особо чистых веществ. Технические условия.

ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002. Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике.

ГОСТ Р 53228-2008. Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания.

ГОСТ ИСО/МЭК 17025-2009. Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий.

ГОСТ Р 8.563-2009. Государственная система обеспечения единства измерений. Методики (методы) измерений.

ГОСТ Р 12.1.019-2009. Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты.

ГОСТ OIML R-111-1-2009. Гири классов E₁, Е₂, F₁, F₂, M₁, М_1-2, М₂, М_2-3 и М₃. Часть 1. Метрологические и технические требования.

ГОСТ 12.0.004-2015. Система стандартов безопасности труда. Организация обучения безопасности труда. Общие положения.

Примечание - При пользовании настоящей методики целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодно издаваемому указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный документ заменён (изменен), то при пользовании настоящей методики следует руководствоваться заменяющим (изменённым) документом. Если ссылочный документ отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3. Требования к показателям точности измерений

3.1. Нормы погрешности измерений

В соответствии с «Перечнем измерений, относящихся к сфере государственного регулирования обеспечения единства измерений и выполняемых при осуществлении деятельности в области охраны окружающей среды и обязательных метрологических требований к ним, в том числе показателей точности» (утвержденным Приказом Минприроды России от 7 декабря 2012 года № 425) предельно допустимая погрешность измерений массовой доли органических и неорганических веществ в почвах δ_н = ± (5...80) %.

3.2. Приписанные характеристики погрешности измерений и ее составляющих

Методика измерений обеспечивает получение результатов измерений с погрешностью, не превышающей значений, приведённых в таблице 1.

Таблица 1 - Диапазон измерений, значение характеристики погрешности методики и ее составляющих

Значения показателя точности методики используют при:

- оформлении результатов измерений, выдаваемых лабораторией;

- оценке возможности использования результатов измерений при реализации методики измерений в конкретной лаборатории;

- проверке квалификации лаборатории.

______________

¹ - значение среднеквадратического отклонения воспроизводимости установлено на основе результатов межлабораторного эксперимента (L = 2).

4. Требования к средствам измерений, вспомогательному оборудованию, материалам и реактивам

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений (СИ), вспомогательное оборудование, реактивы и материалы:

4.1. Требования к средствам измерений

1. Хроматограф жидкостный «UltiMate 3000» фирмы «Dionex» (регистрационный номер по Госреестру СИ № 57678-14), укомплектованный:

- бинарным градиентным насосом высокого давления HPG-3200RS;

- поддоном для элюентов со встроенным дегазатором SRD-3400;

- автосамплером WPS-3000RS (с шприцем объемом 0,1 см³ (кат. № 6822.0002), петлей для пробы объемом 0,1 см³ (кат. № 6820.2403) и буферной петлей объемом 0,1 см³ (кат. № 6820.2413);

- термостатом колонок TCC-3000RS;

- диодноматричным детектором DAD 3000RS с диапазоном работы в области длин волн (190 - 800) нм (предел детектирования по антрацену не более 2×10^-9 г/см³);

- персональным компьютером с программным обеспечением «Chromeleon», версия 6.80.

Примечание - Допускается использовать вместо диодно-матричного детектора спектрофотометрический детектор с пределом детектирования по антрацену не более 2×10^-9 г/см³.

2. Весы лабораторные общего назначения утвержденного типа, высокого класса точности, пределы допускаемой погрешности ±0,5 мг, наибольший предел взвешивания 220 г, ГОСТ Р 53228-2008.

3. Весы лабораторные общего назначения утвержденного типа, среднего класса точности, пределы допускаемой погрешности ±0,1 г, наибольший предел взвешивания 1500 г, ГОСТ Р 53228-2008.

4. Набор гирь от 1 до 100 г класса точности F1, ГОСТ OIMLR-111-1-2009.

5. Колбы мерные: 2-10-2, 2-25-2, ГОСТ 1770-74.

6. Пипетки градуированные: 1-1-2-1, 1-2-2-5, 1-2-2-10, ГОСТ 29227-91.

7. Дозатор ДПОП-1-100-1000 переменного объема 0,1 - 1,0 см³, пределы допускаемой погрешности ±1,0 %, (Госреестр СИ № 41939-09), ТУ 9443-008-33189998-2009.

8. Дозатор ДПОП-1-20-200 переменного объема 0,02 - 0,20 см³, пределы допускаемой погрешности ±1,5 %, (Госреестр СИ № 41939-09), ТУ 9443-008-33189998-2009.

9. Пробирка градуированная П-2-15-14/23 ХС, ГОСТ 1770-74.

4.2. Требования к вспомогательному оборудованию

1. Колонка хроматографическая Ultra С8 (с фазой октилсилан), с внутренним диаметром 4,6 мм, длиной 250 мм, зернением 5,0 мкм, кат. № 9103575, фирмы «Restek».

2. Предколонка Ultra С8 (с фазой октилсилан), с внутренним диаметром 4,0 мм, длиной 10 мм, зернением 5 мкм, кат. № 910350210, фирмы «Restek».

3. Патрон-держатель для предколонки Ultra С8, кат. № 25084 фирмы «Restek».

4. Фильтр Cap Frit для предколонки Ultra С8, с внутренним диаметром 4,0 мм, пористостью 2 мкм, кат. № 25022, фирмы «Restek».

5. Деионизатор воды ДВ-1, производительность 10 дм³/ч, фирмы «ЦветХром», ТУ 2.000.006.

6. УЗ-ванна ПСБ-1335-05, рабочая емкость 155×140×100 мм, рабочая частота 35 кГц (Сертификат соответствия РФ № C-RU.MH06.B.00395).

7. Колба Кн-1-50-14/23 ТС, ГОСТ 25336-82.

8. Центрифуга «Centrifuge» 5702, 4000 об/мин, фирмы «Eppendorf», Германия.

9. Пробирка центрифужная, стеклянная объемом 25 см³, кат. № 2160114, фирмы «DURAN».

10. Шприц Luer lock объемом 25 см³, модель 1025TLL Hamilton^®, кат. № 26212, фирмы «Sigma Aldrich».

11. Бутылка из темного стекла с пробкой под винтовую резьбу БВ-25, ГОСТ Р 51477-99.

12. Банка стеклянная из темного стекла с пробкой под винтовую резьбу БНВ-750, ГОСТ Р 51477-99.

13. Сушильный шкаф электрический СНОЛ-3,5.3,5.3,5/3,5-И2М, с погрешностью измерения температуры ±2 °С, ОСТ 16.0.801.397-87.

14. Стаканчик для взвешивания (бюкс) СВ-24/10, вместимостью 15 см³, ГОСТ 25336-82.

15. Воронка В-25-38 ХС, ГОСТ 25336-82.

16. Ступка 4, ГОСТ 9147-80.

17. Пестик 2, ГОСТ 9147-80.

18. Ложка 1, ГОСТ 9147-80.

19. Холодильник «Samsung» RB 32 FERNCSS, имп.

20. Виалы из темного стекла для автосамплера вместимостью 2 см³, кат. № 29376-U, фирмы «Supelco».

21. Крышки из ПТФЭ с силиконовыми септами для виал, кат. № 29665-U, фирмы «Supelco».

22. Дозатор ДПОП-1-500-5000 переменного объема 0,5 - 5,0 см³, пределы допускаемой погрешности ±1 %, (Госреестр СИ № 41939-09), ТУ 9443-008-33189998-2009.

4.3. Требования к материалам

1. Шприцевой фильтр PTFE, 25 мм × 0,45 мкм, кат. № TR-200102, фирмы «Teknokroma».

4.4. Требования к реактивам

1. 2-(2,4-Динитрофенокси)этанол, «чистый», ТУ 84-07509103.462-96.

2. Ацетонитрил для градиентной ВЭЖХ, массовая доля основного вещества не менее 99,9 %, фирмы «Раnrеас», кат. № 221881.1612.

3. Вода дистиллированная, ГОСТ 6709-72.

Примечания

1. Допускается использование других средств измерений утвержденных типов и вспомогательного оборудования, с метрологическими и техническими характеристиками не хуже указанных. Допускается использование реактивов аналогичной или более высокой квалификации, изготовленных по другой нормативной документации, в том числе импортных.

2. Средства измерений должны быть поверены в установленном порядке.

3. При наличии стандартного образца утвержденного типа состава 2-(2,4-динитрофенокси)этанола с требуемыми характеристиками, доступного к свободному обращению на рынке, применяют соответствующий стандартный образец утвержденного типа вместо реактива (2-(2,4-динитрофенокси)этанола). Сведения об утвержденных типах стандартных образцов содержатся в Федеральном информационном фонде по обеспечению единства измерений.

5. Метод измерений

Измерение массовой доли 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в пробах почвы выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с регистрацией аналитического сигнала диодноматричным или спектрофотометрическим детектором. Анализ осуществляют после извлечения 2-(2,4-динитрофенокси)этанола из проб почвы ацетонитрилом путем экстракции в ультразвуковой ванне, центрифугирования полученного экстракта и последующей фильтрации.

Идентификацию пика 2-(2,4-динитрофенокси)этанола на хроматограмме осуществляют по времени удерживания определяемого компонента.

Для количественного расчета хроматограмм применяют метод абсолютной градуировки.

6. Требования безопасности, охраны окружающей среды

При выполнении измерений массовой доли 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в пробах почвы должны быть соблюдены требования безопасности, охраны окружающей среды, изложенные в инструкции по технике безопасности при работе с 2-(2,4-динитрофенокси)этанолом, и типовой инструкции по технике безопасности при работе в химической лаборатории.

К работе с 2-(2,4-динитрофенокси)этанолом допускаются лица не моложе 18 лет.

Поступающие на работу, а также работающие с 2-(2,4-динитрофенокси)этанолом должны проходить:

• предварительное обучение безопасным методам работы и правилам обращения с защитными средствами;

• специальный инструктаж по технике безопасности с соответствующей записью в установленном порядке согласно ГОСТ 12.0.004-2015;

• предварительные и периодические медицинские осмотры согласно приказу Минздравсоцразвития России от 12.04.2011 № 302н «Об утверждении перечней вредных и (или) опасных производственных факторов и работ, при выполнении которых проводятся обязательные предварительные и периодические медицинские осмотры (обследования), и Порядка проведения обязательных предварительных и периодических осмотров (обследований) работников, занятых на тяжелых работах и на работах с вредными и (или) опасными условиями труда».

Все образующиеся продукты в результате выполнения работ по данной методике (отработанные растворы, твёрдые отходы и пр.) утилизируются. Утилизацию растворов, твердых отходов и проб почвы, содержащих 2-(2,4-динитрофенокси)этанол, после выполнения измерений проводят в соответствии с нормативным документом по утилизации растворов, твёрдых отходов и проб взрывоопасных веществ, разработанным в организации.

При работе с электроустройствами соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ Р 12.1.019-2009 и руководством по эксплуатации приборов.

Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91, взрывобезопасности по ГОСТ 12.1.010-76 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83.

7. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений и обработке их результатов допускают лиц с высшим или средним специальным химическим образованием, прошедших обучение методу высокоэффективной жидкостной хроматографии, проверку знаний, имеющих опыт работы в лаборатории и допуск к работе по данной методике измерений и технике безопасности.

8. Требования к условиям измерений

8.1. При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- температура окружающего воздуха (20 ± 5) °С;

- относительная влажность воздуха (30 - 80) % при 20 °С;

- атмосферное давление (84,0 - 106,7) кПа;

- напряжение в сети (220 ± 10) В;

- частота переменного тока (50 ± 1) Гц.

Содержание вредных веществ в воздухе помещения не должно превышать гигиенические нормативы.

8.2 При выполнении измерений должны соблюдаться следующие условия хроматографического анализа:

- режим элюирования:	изократический;
- элюент:	смесь воды деионизированной и ацетонитрила в объемном соотношении 55:45;
- время хроматографирования:	15 мин;
- скорость подачи подвижной фазы:	1,0 см3/мин;
- аналитическая длина волны:	300 нм;
- температура термостата колонки:	30 °С;
- объем вводимой пробы (автодозатором):	1×10-2 см3

9. Подготовка к выполнению измерений

При подготовке к выполнению измерений проводят следующие работы:

9.1. Подготовка хроматографа

Подготовку хроматографа к работе осуществляют в соответствии с инструкцией по эксплуатации хроматографа.

9.2. Подготовка хроматографической колонки

Хроматографическую колонку подсоединяют через патрон-держатель (со вставленной предколонкой и фильтром Cap Frit) к системе инжектирования, не подключая к детектору. Устанавливают температуру термостата колонок 30 °С и прокачивают через колонку элюент со скоростью 1,0 см³/мин в течение 10 - 15 минут. Затем выход колонки подсоединяют к детектору и устанавливают режим работы хроматографа в соответствии с разделом 8.

9.3. Приготовление растворов

9.3.1. Приготовление исходного раствора 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в ацетонитриле

Исходный раствор 2-(2,4-динитрофенокси)этанола с массовой концентрацией в диапазоне (0,9 - 1,1) мг/см³ готовят в ацетонитриле объемно-весовым методом из образца 2-(2,4-динитрофенокси)этанола (п. 4.4). Для этого взвешивают на весах высокого класса точности бюкс с крышкой, вместимостью 15 см³, вносят в него с помощью фарфоровой ложки (25,0 ± 2,5) мг 2-(2,4-динитрофенокси)этанола, закрывают бюкс крышкой и снова взвешивают. По разности результатов взвешивания вычисляют точную массу навески 2-(2,4-динитрофенокси) этанола (q, мг). Навеску из бюкса количественно переносят в мерную колбу вместимостью 25,0 см³ и растворяют в ацетонитриле. Доводят объем раствора до метки ацетонитрилом и тщательно перемешивают.

Массовую концентрацию 2-(2,4-динитрофенокси)этанола (С_{исх. р-р}, мг/см³) рассчитывают с учётом его массовой доли в исходном реактиве по формуле:

(1)

где q - масса навески 2-(2,4-динитрофенокси)этанола, мг;

к - массовая доля 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в исходном реактиве, %;

V_колбы - объем мерной колбы, см³ (25 см³).

Срок хранения приготовленного исходного раствора 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в ацетонитриле в склянке из темного стекла составляет не более 20 суток при температуре не выше 8 °С.

9.3.2. Приготовление рабочего раствора 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в ацетонитриле с массовой концентрацией 1,0×10^-1 мг/см³

Рабочий раствор 2-(2,4-динитрофенокси)этанола с массовой концентрацией 1,0×10^-1 мг/см³ готовят из исходного раствора 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в ацетонитриле путем разбавления соответствующей аликвоты этого раствора ацетонитрилом в мерной колбе вместимостью 25 см³.

Объем исходного раствора 2-(2,4-динитрофенокси)этанола (V_{исх. р-р}) рассчитывают по формуле:

(2)

где С_{раб. р-р} - заданная концентрация рабочего раствора 2-(2,4-динитрофенокси)этанола (1,0×10^-1 мг/см³), которую необходимо получить, мг/см³;

V_колбы - объем мерной колбы, см³ (25 см³).

В мерную колбу вместимостью 25 см³ вносят рассчитанную по формуле (2) аликвоту исходного раствора 2-(2,4-динитрофенокси)этанола пипеткой вместимостью 5,0 см³. Раствор в колбе доводят до метки ацетонитрилом и тщательно перемешивают.

Срок хранения приготовленного рабочего раствора 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в ацетонитриле в склянке из темного стекла составляет не более 20 суток при температуре не выше 8 °С.

9.3.3 Приготовление градуировочных растворов 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в ацетонитриле с массовыми концентрациями 2,0×10^-4; 5,0×10^-4; 1,0×10^-3; 5,0×10^-3 и 1,0×10^-2 мг/см³

Для приготовления градуировочных растворов с массовыми концентрациями 2-(2,4-динитрофенокси)этанола 1,0×10^-3; 5,0×10^-3 и 1,0×10^-2 мг/см³ используют рабочий раствор 2-(2,4-динитрофенокси)этанола с массовой концентрацией 1,0×10^-1 мг/см³ в ацетонитриле. Для этого в мерные колбы вместимостью 10 см³ соответственно вносят 0,1; 0,5 и 1,0 см³ рабочего раствора 2-(2,4-динитрофенокси)этанола пипеткой вместимостью 1,0 см³. Доводят раствор до метки ацетонитрилом и тщательно перемешивают.

Для приготовления градуировочных растворов с массовыми концентрациями 2-(2,4-динитрофенокси)этанола 2,0×10^-4 мг/см³ и 5,0×10^-4 мг/см³ используют градуировочный раствор 2-(2,4-динитрофенокси)этанола с массовой концентрацией 5,0×10^-3 мг/см³ в ацетонитриле. Для этого в мерные колбы вместимостью 10 см³ соответственно вносят 0,4 см³ и 1,0 см³ градуировочного раствора 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в ацетонитриле с массовой концентрацией 5,0×10^-3 мг/см³ пипеткой вместимостью 1,0 см³. Доводят раствор до метки ацетонитрилом и тщательно перемешивают.

Срок хранения градуировочных растворов 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в ацетонитриле в склянках из темного стекла составляет не более 15 суток при температуре не выше 8 °С.

9.4. Построение градуировочного графика

Приготовленные градуировочные растворы 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в ацетонитриле с массовыми концентрациями 2,0×10^-4; 5,0×10^-4; 1,0×10^-3; 5,0×10^-3 и 1,0×10^-2 мг/см³ (согласно п. 9.3.3) анализируют на хроматографе два раза, инжектируя по 1×10^-2 см³ каждого из градуировочных растворов.

Определяемый компонент идентифицируют по времени удерживания.

Ориентировочное время удерживания 2-(2,4-динитрофенокси)этанола - 6,1 мин.

С использованием стандартной программы сбора и обработки хроматографической информации измеряют на хроматограмме площадь пика 2-(2,4-динитрофенокси)этанола. Аналитические сигналы (по каждому раствору) усредняют.

В соответствии с описанием к системе автоматической обработки данных строят градуировочную зависимость площади хроматографического пика (усредненного значения) от массовой концентрации (мг/см³) введенного в хроматограф градуировочного раствора 2-(2,4-динитрофенокси)этанола.

Градуировочный график должен быть линейным. Проверку линейности следует проводить по действующим нормативным документам, регламентирующим установление градуировочных характеристик средств измерений [4].

9.5. Контроль стабильности градуировочной характеристики

Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят ежедневно (перед анализом каждой серии рабочих проб), а также при смене колонки, реактивов и т.д.

Образцами для контроля стабильности градуировочной характеристики являются градуировочные растворы, приготовленные по п. 9.3.3. Используют не менее двух градуировочных растворов. Данную процедуру выполняют два раза для каждого из двух градуировочных растворов.

С использованием стандартного программного обеспечения прибора для каждого градуировочного раствора в автоматическом режиме определяют массовые концентрации 2-(2,4-динитрофенокси)этанола (С_{изм.гр.1} и С_{изм.гр.2}, мг/см³) и находят их среднее арифметическое значение (, мг/см³):

(3)

Градуировочную характеристику считают стабильной при выполнении для каждого образца для градуировки следующего условия:

(4)

где  - результат контрольного измерения массовой концентрации 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в градуировочном растворе, мг/см³;

С_гр. - значение массовой концентрации 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в градуировочном растворе, мг/см³;

К_гр - норматив контроля стабильности градуировочной характеристики, мг/см³.

Кгр. = 0,01 × δгр. × Сгр.,

(5)

где δ_гр - относительная погрешность построения градуировочного графика, равная 13 %.

Если условие стабильности градуировочного графика (4) не выполняется только для одного градуировочного раствора, необходимо выполнить повторное измерение этого градуировочного раствора с целью исключения результата, содержащего грубый промах.

При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики градуировочный график строят заново.

9.6. Отбор и хранение проб

Отбор проб почвы проводят в соответствии с ГОСТ 17.4.3.01-83 и ГОСТ 17.4.4.02-84.

Пробы почвы (массой не менее 1,0 кг) отбирают в химически чистые емкости из темного стекла с завинчивающимися крышками, предварительно промытые раствором моющего средства и дистиллированной водой и высушенные в сушильном шкафу при температуре 150 °С.

Срок хранения отобранных проб почвы при температуре не выше 8 °С составляет не более 3-х суток.

9.7. Подготовка проб

Из доставленных в лабораторию образцов почвы тщательно удаляют корни, камни, высушивают до воздушно-сухого состояния и растирают среднюю пробу в фарфоровой ступке.

Для анализа коническую колбу вместимостью 50 см³ с пришлифованной пробкой взвешивают на весах среднего класса точности, затем вносят (10,0 ± 0,1) г почвенного образца и снова взвешивают. По разности находят точную навеску пробы почвы.

В колбу с пробой почвы вносят 10,0 см³ ацетонитрила пипеткой вместимостью 10 см³, закрывают пробкой, помещают в УЗ-ванну и экстрагируют 2-(2,4-динитрофенокси)этанол в течение десяти минут.

После экстракции выдерживают пробу в течение 5-ти минут и, не дожидаясь полного расслоения фаз, экстракт декантируют в центрифужную пробирку вместимостью 25 см³.

Аналогично проводят повторную экстракцию пробы 7,0 см³ свежей порции ацетонитрила и объединяют экстракты.

Объединенные экстракты центрифугируют со скоростью 4000 об/мин в течение 10 минут и количественно переносят надосадочную жидкость при помощи пипеточного дозатора переменного объема 0,5 - 5,0 см³, пропуская ее через шприцевой фильтр PTFE, подсоединенный к шприцу Luer lock, в градуированную пробирку вместимостью 15 см³. Затем доводят объем отфильтрованного экстракта ацетонитрилом до отметки объема 15,0 см³, закрывают пробирку пробкой и тщательно перемешивают раствор.

10. Порядок выполнения измерений

Выполнение измерений проводят в условиях в соответствии с п. 8.

Анализ экстракта пробы, подготовленного в соответствии с п. 9.7, проводят на хроматографе два раза, инжектируя по 1×10^-2 см³.

Определяемый компонент идентифицируют по времени удерживания.

Ориентировочное время удерживания 2-(2,4-динитрофенокси)этанола приведено в п. 9.4.

С использованием стандартной программы сбора и обработки хроматографической информации измеряют на хроматограмме площадь пика 2-(2,4-динитрофенокси)этанола.

11. Обработка результатов измерений

11.1. С использованием стандартной программы обработки данных по градуировочному графику определяют массовые концентрации 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в экстракте пробы (С_экстр.1 и С_экстр.2, мг/см³) и находят их среднее арифметическое значение :

(6)

11.2. Результат единичного анализа - массовую долю 2-(2,4-динитрофенокси)этанола (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

(7)

где  - среднее арифметическое значение результатов двух определений массовой концентрации 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в экстракте пробы, найденных по градуировочному графику, мг/см³;

V_экстр. - объем экстракта, полученный в соответствии с п. 9.7, см³ (15,0 см³);

10³ - коэффициент пересчёта г в кг;

m - масса анализируемой пробы почвы, г (10 г);

b - коэффициент, учитывающий потери вещества на стадиях пробоподготовки, равный 0,83.

11.3. За результат измерений массовой доли 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в пробе (, мг/кг) принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений Х₁ и X₂, полученных в условиях повторяемости:

(8)

для которых выполняется следующее условие:

(9)

где r_o - относительное значение предела повторяемости для двух результатов параллельных определений, % (таблица 2).

При невыполнении условия (9) необходимо дополнительно получить еще два результата параллельных определений. Если при этом расхождение (Х_mах - Х_min) результатов четырех параллельных определений равно или меньше критического диапазона CR_0,95(4), выраженного в абсолютных единицах по формуле (10), то в качестве окончательного результата принимают среднее арифметическое значение результатов четырех параллельных определений (, мг/кг).

(10)

Значение критического диапазона для четырех результатов параллельных определений в относительных единицах (CR_0,95(4),_o, %) приведено в таблице 2.

Если расхождение (Х_mах - Х_min) больше значения критического диапазона, в качестве окончательного результата измерений может быть принята медиана четырех результатов параллельных определений. Кроме того, целесообразно выяснить причины появления неприемлемых результатов параллельных определений и устранить их.

11.4. Расхождение между результатами измерений, полученными в двух лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости, выраженного в абсолютных единицах (относительно среднего значения двух результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости).

При выполнении этого условия приемлемы оба результата измерений и в качестве окончательного может быть использовано их общее среднее значение. Значения предела воспроизводимости в относительных единицах приведены в таблице 2.

При превышении предела воспроизводимости могут быть использованы методы оценки приемлемости результатов измерений согласно разделу 5 ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 и МИ 2881-2004 [5].

Таблица 2 - Диапазон измерений, значения пределов повторяемости, воспроизводимости и критического диапазона при доверительной вероятности Р = 0,95

12. Оформление результатов измерений

Результаты измерений регистрируют в протоколе испытаний, который оформляют в соответствии с ГОСТ ИСО/МЭК 17025-2009.

Результаты измерений массовой доли 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в пробах почвы , мг/кг, представляют в виде (при подтвержденном в лаборатории соответствии аналитической процедуры требованиям настоящего документа):

(11)

где  - результат измерений массовой доли 2-(2,4-динитрофенокси)этанола, полученный в соответствии с процедурами разделов 9.7, 10 и 11, мг/кг;

∆ - абсолютная погрешность измерений массовой доли 2-(2,4-динитрофенокси)этанола, мг/кг, вычисляемая по формуле:

(12)

где δ - относительная погрешность измерений массовой доли определяемого компонента, по таблице 1, %.

Примечание - Числовые значения результата измерений оканчиваются цифрой того же разряда, что и значение показателя точности методики измерений (абсолютной погрешности измерений массовой доли определяемого компонента, с числом значащих цифр не более двух).

Допустимо результат измерений представлять в виде:

(13)

при условии ∆_л < ∆, где ∆_л - значение показателя точности измерений (доверительные границы абсолютной погрешности измерений), установленное при реализации настоящей методики в лаборатории и обеспечиваемое контролем стабильности результатов измерений, мг/кг.

Примечание - При необходимости (в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002, раздел 5.2) для результата измерений  указывается количество параллельных определений и способ установления результата измерений.

13. Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории

13.1. Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории предусматривает:

- оперативный контроль процедуры измерений;

- контроль стабильности результатов измерений (на основе контроля стабильности среднеквадратического отклонения повторяемости, среднеквадратического отклонения внутрилабораторной прецизионности, погрешности).

13.2. Оперативный контроль процедуры измерений проводят на основе контроля внутрилабораторной прецизионности и погрешности.

13.2.1. Контроль внутрилабораторной прецизионности осуществляют путем сравнения результатов измерений массовой доли 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в пробе, полученных в условиях внутрилабораторной прецизионности. Расхождение между результатами измерений не должно превышать предела внутрилабораторной прецизионности, выраженного в абсолютных единицах:

(14)

где ,  - результаты измерений массовой доли 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в пробе, полученные в условиях внутрилабораторной прецизионности, мг/кг;

 - среднее арифметическое значение результатов измерений массовой доли 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в пробе, полученных в условиях внутрилабораторной прецизионности, мг/кг;

R_л,о - относительное значение предела внутрилабораторной прецизионности, %.

Значение R_л,о (%) может быть приведено в Протоколе установленных показателей качества результатов анализа при реализации методики измерений в лаборатории.

При невыполнении условия (14) контрольную процедуру повторяют. При повторном невыполнении условия (14) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

13.2.2. Контроль погрешности с использованием образцов для контроля.

Образцы для контроля готовят путем внесения соответствующих аликвот исходного раствора 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в ацетонитриле, подготовленного по п. 9.3.1, и рабочего раствора 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в ацетонитриле, подготовленного по п. 9.3.2, при помощи пипеточного дозатора переменного объема 0,02 - 0,20 см³ в пробы почвы (навески массой 10 г), не содержащие 2-(2,4-динитрофенокси)этанол.

Образцы для контроля (ОК) используют в течение рабочего дня.

Подготовку ОК к выполнению измерений проводят в соответствии с п. 9.7. Выполнение измерений проводят в соответствии с п. 10.

Контроль погрешности осуществляют путем сравнения результата отдельно взятой контрольной процедуры К_к с нормативом контроля К. Результат контрольной процедуры К_к рассчитывают по формуле:

(15)

где  - массовая доля 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в ОК - среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми удовлетворяет условию (9), мг/кг;

С - массовая доля 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в ОК, мг/кг.

Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

К = ∆л,

(16)

где ∆_л - абсолютное значение характеристики погрешности результатов измерений, соответствующее массовой доле 2-(2,4-динитрофенокси)этанола в ОК, мг/кг, рассчитанное по формуле:

∆л = 0,01 × δл × С,

(17)

где δ_л - относительная погрешность измерений массовой доли определяемого компонента, %.

Значение δ_л (%) может быть приведено в Протоколе установленных показателей качества результатов анализа при реализации методики измерений в лаборатории.

Результат контрольной процедуры признают удовлетворительным при выполнении условия:

(18)

При невыполнении условия (18) контрольную процедуру повторяют. При повторном невыполнении условия (18) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

13.3. Периодичность контроля исполнителем процедуры выполнения измерений, а также реализуемые процедуры контроля стабильности результатов выполняемых измерений регламентируют во внутренних документах лаборатории.

14. Библиографические данные

1. Р 50.2.060-2008. Рекомендации по метрологии. Государственная система обеспечения единства измерений. Внедрение стандартизированных методик количественного химического анализа в лаборатории. Подтверждение соответствия установленным требованиям. М.: Стандартинформ, 2008 - 27 с.

2. Пат. № 2179989 Российская Федерация, C09D101/12. Термопластичный малодымный бронесостав на основе ацетилцеллюлозы с повышенной термостойкостью / Пупин Н.А., Васильева И.А., Красильников Ф.С.; заявитель и патентообладатель Федеральное государственное унитарное предприятие «Научно-исследовательский институт полимерных материалов». - № 2001103482/04; заявл. 05.02.2001; опубл. 27.02.2002.

3. ТУ 84-07509103.462-96. 2-(2,4-Динитрофенокси)этанол. Технические условия. -7 с.

4. РМГ 54-2002. ГСИ. Характеристики градуировочные средств измерений состава и свойств веществ и материалов. Методика выполнения измерений с использованием стандартных образцов. - Екатеринбург: УНИИМ, 2004 - 9 с.

5. МИ 2881-2004. ГСИ. Государственная система обеспечения единства измерений. Методики количественного химического анализа. Процедуры проверки приемлемости результатов анализа. - Екатеринбург: УНИИМ, 2004 - 17 с.