УТВЕРЖДАЮ

Главный государственный санитарный

врач Российской Федерации,

Первый заместитель Министра

здравоохранения Российской Федерации

Г.Г. Онищенко

29 июня 2003 г.

Дата введения: с момента утверждения

 

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Спектрофотометрическое измерение
массовых концентраций аллохола (по сумме
желчных кислот) в воздухе рабочей зоны

Методические указания

 

МУК 4.1.1615-03

 

 

 

1. Область применения

Настоящие методические указания устанавливают количественный спектрофотометрический анализ воздуха рабочей зоны на содержание суммы желчных кислот в диапазоне концентраций 0,05 - 0,50 мг/м³.

2. Характеристика вещества

2.1. Физико-химические свойства.

В состав лекарственного препарата аллохол входят желчь сухая бычья (38 %), чеснок сушеный (19 %), листья крапивы (2,4 %), уголь активированный (11,9 %) и вспомогательные вещества (28,7 %). В желчи содержатся различные желчные кислоты - монокарбоновые гидроксикислоты, относящиеся к классу стероидов, кристаллы с температурами плавления от 140 до 250 °С. В желчи быка присутствуют в основном холевая (Т_пл. 199 °С) и дезоксихолевая (Т_пл. 177 °С) кислоты в виде щелочных солей конъюгатов указанных кислот с таурином или глицином, при этом массовая доля холевых кислот составляет не менее 30 %.

Желчные кислоты плохо растворимы в воде, растворимы в этиловом спирте.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

2.2. Токсикологическая характеристика.

Препарат аллохол обладает общетоксическим и гепатотропным действием.

Предельно допустимая концентрация препарата аллохола в воздухе рабочей зоны (по сумме массовых концентраций желчных кислот) - 0,1 мг/м³.

3. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений массовых концентраций суммы желчных кислот в воздухе с погрешностью, не превышающей ± 15 % при доверительной вероятности 0,95.

4. Метод измерений

Измерение массовых концентраций желчных кислот (по холевой кислоте) выполняется методом спектрофотометрии. Метод основан на взаимодействии кислот с сахарозой с образованием окрашенного в желтый цвет продукта реакции. Измерение проводят при длине волны 575 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения содержания желчных кислот в анализируемой пробе 20 мкг.

Нижний предел измерения концентрации желчных кислот в воздухе (при отборе 1000 дм³ воздуха) 0,05 мг/м³.

Определению не мешают крахмал, тальк, магния карбонат, титана диоксид, тропеолин.

5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы

5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы

Спектрофотометр СФ-46

Пробоотборное устройство ПУ-3Э                                                  ТУ 4215-11696625-95

Весы аналитические ВЛА-200                                                         ГОСТ 24104-88Е

Меры массы Г-2-2106 2 кл                                                                ГОСТ 7328-82Е

Фильтр АФА-ВП-10                                                                          ТУ 95-743-80

Колбы мерные, вместимостью 50, 100 и 500 см³                           ГОСТ 1770-74Е

Цилиндр мерный, вместимостью 500 см³                                       ГОСТ 1770-74Е

Пипетки, вместимостью 1, 2, 5 и 10 см³                                          ГОСТ 29227-91

Бюксы ⁵⁰/₃₀                                                                                           ГОСТ 25336-82Е

Пробирки с пришлифованными пробками, вместимостью

10 см³                                                                                                   ГОСТ 25336-82Е

Кюветы с толщиной оптического слоя 50 мм

Стаканчики для взвешивания                                                          ГОСТ 25336-82Е

Баня водяная                                                                                       ТУ 64-1-2850-76

Термометр                                                                                           ГОСТ 215-73

Холодильник бытовой                                                                      ГОСТ 16317-87

5.2. Реактивы

Холевая кислота, содержание основного вещества 98 %             ТУ 6-09-10-1585-83

Серная кислота концентрированная, плотность 1,84 г/см³           ГОСТ 4204-77

Спирт этиловый, хч                                                                           ГОСТ 5963-67

Сахароза                                                                                              ГОСТ 5833-75

Кислота уксусная ледяная                                                                 ГОСТ 61-75

Вода дистиллированная                                                                    ГОСТ 6709-72

Допускается применение иных средств измерения, вспомогательных устройств, реактивов и материалов, обеспечивающих показатели точности, установленные для данных методических указаний.

6. Требования безопасности

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться меры противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-76.

6.3. При выполнении измерений с использованием спектрофотометра соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

6.4. Работа на спектрофотометре должна проводиться в чистом помещении, свободном от пыли, паров кислот и щелочей. Вблизи спектрофотометра не должны располагаться громоздкие изделия, создающие неудобства в работе оператора.

6.5. В процессе работы необходимо соблюдать правила техники безопасности при работе с химической посудой.

7. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица с высшим и средним специальным образованием, имеющие навыки работы на спектрофотометре.

8. Условия измерений

8.1. Процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят в нормальных условиях при температуре воздуха (20 ± 5) °С, атмосферном давлении 84 - 106 кПа и влажности воздуха не более 80 %.

8.2. Выполнение измерений на спектрофотометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9. Подготовка к выполнению измерений

9.1. Приготовление растворов

9.1.1. Приготовление стандартного раствора кислоты холевой концентрацией 100 мкг/см³. Навеску 10 мг кислоты холевой растворяют в нескольких см³ спирта этилового в мерной колбе вместимостью 100 см³ и доводят объем раствора спиртом до метки. Срок годности раствора - 10 суток при хранении в холодильнике.

9.1.2. Приготовление раствора сахарозы концентрацией 10 мг/см³. Растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 см³ 1 г сахарозы и доводят объем раствора водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

9.1.3. Приготовление 8 М раствора кислоты серной. В колбе вместимостью 500 см³ к 200 см³ дистиллированной воды осторожно, при постоянном перемешивании, прибавляют 213 см³ кислоты серной концентрированной и доводят водой до метки. Срок годности раствора - 1 месяц при хранении в комнатных условиях.

9.2. Подготовка прибора

Подготовку спектрофотометра проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

9.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость величины оптической плотности раствора от массы вещества в анализируемой пробе, устанавливают по методу абсолютной градуировки с использованием серии градуировочных растворов согласно табл. 1, которые готовят путем соответствующего разбавления стандартного раствора кислоты холевой этиловым спиртом с помощью пипеток в пробирках с притертыми пробками. Растворы можно хранить при комнатной температуре в течение 7 ч, в холодильнике - в течение недели.

Для получения градуировочной зависимости по 2 см³ каждого градуировочного раствора переносят в колбу на 50 см³ с притертой пробкой, прибавляют 0,8 см³ раствора сахарозы, пробирку с раствором ставят в стакан со смесью воды со льдом, прибавляют 10 см³ 8 М раствора кислоты серной и тщательно перемешивают. Пробирку с раствором помещают в водяную баню при 60 °С на 20 мин., после чего сразу же охлаждают в стакане со смесью воды со льдом, прибавляют 10 см³ кислоты уксусной ледяной и измеряют оптическую плотность на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 575 нм в кювете с толщиной слоя 50 мм. В качестве раствора сравнения используют градуировочный раствор № 1.

Проводят по 5 параллельных определений для каждого из 6 растворов и строят градуировочную зависимость величины оптической плотности от количества вещества в анализируемой пробе.

Проверку градуировочного графика проводят 1 раз в 3 месяца или в случае смены партии реактивов, оборудования или приборов.

Таблица 1

Растворы для установления градуировочной характеристики при измерении массовых концентраций желчных кислот

9.4. Отбор проб воздуха

Воздух с объемным расходом 40 дм³/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-10, помещенный в фильтродержатель. Для определения ¹/₂ ПДК аллохола следует отобрать 1000 дм³ воздуха. Пробы можно хранить в течение недели.

10. Выполнение измерения

Фильтр с отобранной пробой помещают в бюкс с пришлифованной крышкой и приливают пипеткой 5 см³ этилового спирта. Периодически встряхивая, выдерживают раствор в течение 5 мин и сливают в пробирку. Степень экстракции с фильтра 95 %. Отбирают пипеткой 2 см³ экстракта и проводят фотометрические реакции аналогично тому, как и при построении градуировочного графика. Количественное определение содержания суммы свободных желчных кислот в растворе проводят по предварительно построенному градуировочному графику, полученному с помощью растворов холевой кислоты по отношению к раствору сравнения, используя чистый фильтр.

11. Расчет концентрации вещества

Концентрацию суммы желчных кислот в воздухе (С, мг/м³) вычисляют по формуле:

 где

а - содержание желчных кислот в объеме пробы, взятой для анализа, мкг;

в - общий объем экстракта с фильтра, см³;

б - объем пробы, взятой для анализа, см³;

V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, дм³ (см. прилож. 1).

12. Оформление результатов анализа

Результат количественного анализа представляют в виде (С ± D) мг/м³, Р = 0,95, где D - характеристика погрешности, D = 0,005 + 0,15С.

13. Контроль погрешности методики

Значения характеристики погрешности, норматива оперативного контроля точности и норматива оперативного контроля воспроизводимости приведены в табл. 2 в виде зависимости от значения массовой концентрации анализируемого компонента в пробе С.

Таблица 2

Результаты метрологической аттестации методики количественного химического анализа

13.1. Оперативный контроль воспроизводимости

Оперативный контроль воспроизводимости выполняют в одной серии с анализом рабочих проб. Проводят отбор двух воздушных проб с использованием двух пробоотборников одновременно. Анализируют в соответствии с прописью методики, привлекая различных исполнителей и максимально варьируя условия проведения анализа: партии реактивов, наборы мерной посуды и т.д., и получают два результата С₁ и С₂ анализов. Решение об удовлетворительной воспроизводимости принимают при выполнении условия:

 где

D - норматив оперативного контроля воспроизводимости. При превышении расхождения между двумя результатами анализа норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

Внутренний оперативный контроль воспроизводимости проводят не реже, чем 1 раз в месяц.

13.2. Оперативный контроль точности

Оперативный контроль точности выполняют в одной серии с анализом рабочих проб. Проводят отбор двух воздушных проб с использованием двух пробоотборников одновременно, затем к одной пробе делают добавку анализируемого компонента δС, нанося на фильтр дозу раствора, содержащего анализируемый компонент. Величина добавки должна соответствовать 50 - 150 % от содержания компонента в пробе. Результаты анализа С₁ без добавки и С₂ с добавкой получают по возможности в одинаковых условиях: одним аналитиком, с одной партией реактивов, с одним набором посуды и т.д.

Погрешность процедуры отбора проб контролируют путем поверки используемых пробоотборников. Решение об удовлетворительной погрешности принимают при выполнении условия:

 где

K - норматив оперативного контроля точности.

14. Нормы затрат времени на анализ

Для проведения серии анализов из 6 проб при последовательном отборе проб воздуха требуется 6 ч.

Методические указания разработаны Российским государственным медицинским университетом (лаборатория токсикологии и экологии, Е.Б. Гугля).

Приложение 1

Приведение объема воздуха к стандартным условиям

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и давление 101,33 кПа) проводят по формуле:

, где

V_t - объем воздуха, отобранного для анализа, дм³;

Р - барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);

t - температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Для удобства расчета V₂₀ следует пользоваться таблицей коэффициентов (прилож. 2). Для приведения воздуха к стандартным условиям надо умножить V_t на соответствующий коэффициент.

Приложение 2

Коэффициенты для приведения объема воздуха к стандартным условиям

Приложение 3

Указатель основных синонимов, технических, торговых и фирменных названий веществ

1. Амиодарон

2. Амоксициллина тригидрат

3. Ацикловир

4. Витамин А

5. Галоперидол

6. Ксиланаза

7. Лоперамида гидрохлорид

8. Мексидол

9. Мексикор

10. Офлоксацин

11. Пиразинамид

12. Ретинола ацетат

13. Родопол-23

14. Симвастатин

15. Трамадол

16. Хладон-23

17. Хладон-31-10

18. Хладон-116

19. Хладон-122

20. Хладон-R11511

21. Цианборгидрид натрия

22. Этамбутола дигидрохлорид

Приложение 4

Вещества, определяемые по ранее утвержденным методическим указаниям

 

СОДЕРЖАНИЕ