4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ Измерение концентраций
Фамоксадона СБОРНИК МЕТОДИЧЕСКИХ УКАЗАНИЙ ВЫПУСК 1 МОСКВА 1. Сборник подготовлен: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим. н. Довгилевич А.В.); Всероссийским НИИ фитопатологии (А.М. Макеев и др.); Всероссийским НИИ защиты растений (В.И. Долженко и др.); Санкт-Петербургским НИИ лесного хозяйства (Маслаков С.Е., Л.В. Григорьева и др.), при участии Департамента Госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов). 2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Минздраве России. 3. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко. 4. Введены впервые. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации, Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации Г.Г. Онищенко Дата введения: 1 января 2003 г. 4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ Измерение концентраций Фамоксадона Методические указания 1. Вводная частьФирма-производитель: Дюпон, США. Торговое название: Танос, КР 481. Синонимы: JE-874. Название действующего вещества по ИСО: Фамоксадон. Название действующего вещества по IUPAC: 3-анилино-5-метил-5-(4-феноксифенил)-2,4-оксазолидиндион. C22H18N2O4 M. м. 374,4 Химически чистый Фамоксадон представляет собой светлый кремовый порошок. Давление паров: 6,4 × 10-7 Ра (4,8 × 108 мм Hq) при 20 °С Температура плавления: 140,3 - 141,8 °С. Коэффициент распределения н-октанол-вода: 4,8 (рН 5); 4,65 (рН 7); 5,55 (рН 9). Растворимость в воде зависит от кислотности среды и составляет 243 × 10-6 г/л при рН 5; 111 × 10-6 г/л при рН 7, при рН 9 вещество быстро гидролизуется. Растворимость в органических растворителях (г/л при 20 °С): ацетон - 274, ацетонитрил - 125, гексан - 0,0476, дихлорметан - 239, метанол - 10, толуол - 13,3, этилацетат - 124, н-октанол - 1,78. Фамоксадон нестабилен в водных растворах. Гидролиз наблюдается в диапазоне рН 5 - 9, и время полураспада составляет 41 день, 2 дня и 93 минуты при рН 5,0; 7,0 и 9,0 соответственно. Период полураспада при фотолизе составляет 4,6 дней и 3,9 часов при рН 5 и 7,75 соответственно. Краткая гигиеническая характеристика Фамоксадон относится к малоопасным соединениям по острой (ЛД50 для крыс - более 5000 мг/кг) и дермальной токсичности (ЛД50 для крыс - более 2000 мг/кг) и умеренно опасным по ингаляционной (ЛК50 (4 часа) 5300 мг/м3) токсичности, не вызывает раздражения глаз и кожи. В РФ установлены следующие гигиенические нормативы: ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 1,0 мг/м3; ОБУВ в атмосферном воздухе - 0,01 мг/м3. Область применения Фамоксадон (JE-874) - фунгицид из группы оксазолидиндионов контактного действия с глубинным эффектом. Является ингибитором митохондриального дыхания, специфически связываясь с активным центром убихинол-цитохром С оксидоредуктазы. Используется в заводских смесях с цимоксанилом и флусилазолом в антирезистентных системах применения фунгицидов. Высокоэффективен против возбудителей из класса Оомицетов, в т.ч. против рас возбудителей, устойчивых к фениламидам. Зарегистрирован в России под названием Танос (DPX-KP 481), диспергируемые в воде гранулы, 50 % (25 % фамоксадона + 25 % цимоксанила) на картофеле с нормой расхода 0,6 кг/га, трехкратная обработка за сезон, проходил испытания на огурцах открытого и закрытого грунта. 2. Методика измерения концентраций Фамоксадона (DРХ-JE 874) в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе методом высокоэффективной жидкостной хроматографии2.1. Основные положения2.1.1. Принцип метода Методика основана на определении вещества с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором. Отбор проб воздуха осуществляется концентрированием аэрозоля на бумажные фильтры «синяя лента». Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки. 2.1.2. Избирательность метода В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы, в т.ч. Цимоксанила. 2.1.3. Метрологическая характеристика метода (Р = 0,95)
2.2. Реактивы, растворы и материалы
2.3. Приборы, аппаратура, посуда
2.4. Отбор пробОтбор проб воздуха рабочей зоны следует осуществлять в соответствии с требованиями ГОСТов 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны». Воздух со скоростью 5 л/мин пропускают через фильтр «синяя лента», помещенный в фильтродержатель. Для измерения концентрации вещества по п. 2.7.1 на уровне 0,013 мг/м3, по п. 2.7.2 на уровне 0,006 мг/м3 следует отобрать 75 л воздуха. Фильтры с отобранными пробами, помещенные в герметически закрываемые склянки, можно хранить в морозильной камере при температуре -18 °С в течение 4 дней. 2.5. Подготовка к определению2.5.1. Приготовление 10 мМ фосфатного буферного раствора 1,32 г однозамещенного фосфата калия растворяют в бидистиллированной воде в мерной колбе вместимостью 1000 мл, доводят рН раствора до 3 с помощью ортофосфорной кислоты, контролируя его значение с помощью иономера. 2.5.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ № 1 (измерение по п. 2.7.1) Отмеряют 650 мл ацетонитрила, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл, добавляют 350 мл 10 мМ фосфатного буферного раствора (рН 3), перемешивают, фильтруют и дегазируют. 2.5.3. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ № 2 (измерение по п. 2.7.2) Отмеряют 550 мл ацетонитрила, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл, добавляют 450 мл 10 мМ фосфатного буферного раствора (рН 3), перемешивают, фильтруют и дегазируют. 2.5.4. Кондиционирование колонки Промыть колонку для ВЭЖХ соответствующей подвижной фазой при скорости подачи растворителя 100 мкл/мин (измерение по п. 2.7.1) или 1 мл/мин (измерение по п. 2.7.2) в течение 30 - 45 мин до получения стабильной базовой линии. 2.5.5. Приготовление стандартных растворов Основной стандартный раствор фамоксадона (DPX-JE 874) с содержанием 1,0 мг/мл готовят растворением 0,1004 г препарата, содержащего 99,6 % д. в., в ацетонитриле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранится в морозильной камере при -18 °С в течение 15 дней. Рабочие стандартные растворы с концентрацией 1,0; 2,0; 5,0; 10,0 и 20,0 мкг/мл (измерение по п. 2.7.1) готовят из основного стандартного раствора соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой для ВЭЖХ № 1 (п. 2.5.2). Рабочие растворы хранят в морозильной камере при -18 °С не более 3 дней. Рабочие стандартные растворы с концентрацией 0,025; 0,05; 0,1 и 0,25 мкг/мл (измерение по п. 2.7.2) готовят из основного стандартного раствора соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой для ВЭЖХ № 1 (п. 2.5.2). Растворы готовят непосредственно перед употреблением. 2.5.6. Построение градуировочного графика 2.5.6.1. Градуированный график А (измерение по п. 2.7.1). Для построения градуировочного графика в инжектор хроматографа вводят по 5 мкл рабочего стандартного раствора фамоксадона с концентрацией 1,0; 2,0; 5,0; 10,0 и 20,0 мкг/мл. 2.5.6.2. Градуировочный график В (измерение по п. 2.7.2). Для построения градуировочного графика в инжектор хроматографа вводят по 20 мкл рабочего стандартного раствора Фамоксадона с концентрацией 0,025; 0,05; 0,1 и 0,25 мкг/мл. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят градуировочный график (А или В) зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации фамоксадона в растворе в мкг/мл. 2.6. Описание определенияФильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 мл, заливают 10 мл ацетона, оставляют на 10 - 15 минут, периодически перемешивая. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетона объемом 10 мл. Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °С, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 1 мл (измерение по п. 2.7.1) или в 20 мл (измерение по п. 2.7.2) подвижной фазы для ВЭЖХ № 1 (п. 2.5.2), фильтруют или центрифугируют для удаления взвеси и хроматографируют. 2.7. Условия хроматографирования2.7.1. Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Милихром (Россия) Колонка стальная длиной 64 мм, внутренним диаметром 2 мм, содержащая Separon C18, зернением 5 мкм.
Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 20 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ № 1 (п. 2.5.2). 2.7.2. Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Waters Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4,6 мм, содержащая Lichrosorb RP-18, зернением 5 мкм
Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,25 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ № 1 (п. 2.5.2). 2.8. Обработка результатов анализаСодержание фамоксадона рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле: , где Х - содержание фамоксадона (DPX-JE 874) в пробе воздуха, мг/м3; С - концентрация Фамоксадона в хроматографируемом растворе, найденная по калибровочному графику, мкг/мл; W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл; V - объем пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20 °С), дм3. 3. Требования техники безопасностиНеобходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами. 4. РазработчикиКалинин В.А., проф., к. с-х. н., Довгилевич Е.В., ст. н. с., к. биол. н., Калинина Т.С., ст. н. с., к. с-х. н., Довгилевич А.В., ст. н. с., к. хим. н., Устименко Н.В., ст. н. с., к. биол. н. Московская сельскохозяйственная академия им. К.А. Тимирязева. 127550, Москва, Тимирязевский пр., 2, кафедра химических средств защиты растений. Телефон: 976-43-26. СОДЕРЖАНИЕ
|