Государственное
санитарно-эпидемиологическое УТВЕРЖДЕНО Председатель Госкомсанэпиднадзора России Главный государственный санитарный врач Российской Федерации Е.Н. Беляев 8 июня 1996 г. МУК 4.1.0.416-96 Дата введения: с момента утверждения 4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ Измерение концентраций витамина B1 методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) в воздухе рабочей зоныМ. м. 426,17 Витамин B1 (тиамина бромид) - (4-метил-5-b-оксиэтил-N-(2-метил-4-амино-5-метилпиримидил)-тиазолий бромид гидробромид) - кристаллическое вещество белого цвета со слабым специфическим запахом. Хорошо растворим в воде, метиловом и этиловом спиртах. Трудно растворим в ацетоне. Не растворим в эфире, бензоле, хлороформе. Тпл. - 210 - 215 °С. В воздухе находится в виде аэрозоля. Обладает специфическим аллергенным действием. ПДК в воздухе - 0,1 мг/м3. Характеристика метода Метод основан на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора. Отбор проб производится с концентрированием на фильтр. Нижний предел измерения витамина B1 в хроматографируемом объеме пробы (30 мкл) - 0,3 мкг. Нижний предел измерения витамина B1 в воздухе - 0,05 мг/м3 (при отборе 600 л воздуха). Диапазон измеряемых концентраций витамина B1 в воздухе - от 0,05 до 1 мг/м3. Суммарная погрешность измерения не превышает ± 20 %. Время выполнения измерения, включая отбор проб, - около 40 мин. Приборы, аппаратура, посуда Микроколоночный жидкостной хроматограф «Милихром-2» или другие модели с УФ-детектором Хроматографическая колонка, длиной 120 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом «Силасорб SPH C18» с размером зерен 9 мкм, (ЧСФР) Электроаспиратор ЭА-1 ОСТ 95.10052-84 Микроскоп отсчетный типа ПМБ-2 ТУ 3-3.824-78 Фильтродержатель, снабженный металлической сеткой Стеклянная ректификационная колонна, длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5 (или другая ТУ 25-1173.131-85 такого же типа). Насадка - спиральки Левина из нержавеющей стали (2 ´ 2 ´ 0,2 мм) Колбы мерные, вместимостью 100 мл ГОСТ 1770-74 Пипетки, вместимостью 1 и 10 мл ГОСТ 20292-74 Пробирки с пришлифованными пробками, вместимостью 10 мл ГОСТ 10515-75 Реактивы, растворы, материалы Витамин B1 фармакопейный, 99 % чистоты Калий марганцовокислый (калий перманганат) ТУ 20490-75 Ацетонитрил очищенный ТУ 6-09-3534-82 Ацетонитрил очищенный получают из ацетонитрила, ч., путем ректификации с предварительной химической обработкой, которая заключается в кипячении растворителя с обратным холодильником в присутствии перманганата калия из расчета 1 г перманганата калия на 1 л растворителя. Кипячение проводится до полного перехода перманганата калия в двуокись марганца. Перед ректификацией осадок двуокиси марганца отделяют путем фильтрации через фильтр Шотта № 4. Ректификационная колонна длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5. Насадка - спиральки Левина из нержавеющей стали (2 ´ 2 ´ 0,2 мм) Основную фракцию отбирают при температуре 81,6 °С (атмосферное давление) в пределах колебаний ± 0,1 °С Элюент: ацетонитрил-вода (4:1) Основной стандартный раствор с концентрацией витамина В1 200 мкг/мл готовят растворением 0,02 г вещества в воде в мерной колбе, вместимостью 100 мл. Раствор устойчив при хранении в холодильнике в течение недели. ФильтрыАФА-ВП-10 ТУ 85-743-80 Отбор пробы воздуха Воздух с объемным расходом 30 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-10. Для определения 1/2 ОБУВ достаточно отобрать 600 л воздуха. Пробы можно хранить в закрытых сосудах в холодильнике в течение месяца. Подготовка к измерению Хроматографическая колонка промышленного изготовления. Градуировочные растворы готовят согласно таблице. Таблица
Инжектируют в хроматограф по 30 мкл каждого из градуировочных растворов (от 0,3 до 6 мкг витамина B1). Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб: скорость подачи элюента (ацетонитрил-вода, 5:1) 300 мкл/мин; длина волны УФ-детектора 242 нм; скорость движения диаграммной ленты 3 мм/мин; диапазон чувствительности детектора 0,2; диапазон измерения самопишущего потенциометра 100 мВ; объем вводимой пробы 30 мкл; время удерживания витамина B1 9 мин; элюирующий объем 2700 мкл; эффективность колонки по витамину B1 900 тт. На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят градуировочный график, выражающий зависимость площади пиков (мм2) от содержания витамина B1 в хроматографируемом объеме пробы (мкг). Построение градуировочного графика необходимо проводить не менее, чем по 6 точкам, выполняя по 5 параллельных измерений для каждого инжектируемого объема. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц. Проведение измерения Оба фильтра с отобранными пробами помещают в общую пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 3 мл воды и оставляют на 15 мин при комнатной температуре и периодическом перемешивании. Степень десорбции с фильтра - 96,5 %. Инжектируют в хроматограф 30 мкл полученного раствора. Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях и по отношению к тому же элюенту, что и при построении градуировочного графика. Количественное определение содержания витамина B1 в хроматографируемом объеме проводят по предварительно построенному градуировочному графику. Расчет концентрации Концентрацию витамина B1 (С) в воздухе (мг/м3) вычисляют по формуле:
а - содержание витамина B1 в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг; б - объем пробы, взятой на хроматографирование, мл; в - общий объем анализируемого раствора, мл; V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (см. приложение 1). Методические указания разработаны НИО «Экотокс», г. Москва. Приложение 1Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и давление 760 мм рт. ст.)проводят по формуле
Vt - объем воздуха, отобранный для анализа, л; Р - барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.); t - температура воздуха в месте отбора пробы, °С. Для удобства расчета V20 следует пользоваться таблицей коэффициентов (приложение 2). Для приведения воздуха к стандартным условиям надо умножить Vt на соответствующий коэффициент. Приложение 2Коэффициенты для приведения объема воздуха к стандартным условиям
Приложение 3
Рис. 1 Ловушка-концентратор. Общий вид.
Рис. 2 Ловушка-концентратор. Приложение 4Вещества, определяемые по ранее утвержденным методическим указаниям
|