Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав
потребителей Сборник Часть 3 В сборник включены методические документы, содержащие правила и методы исследований (испытаний) и измерений, а также правила отбора образцов для проведения исследований (испытаний) и измерений, в соответствии с постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации Г.Г. Онищенко от 08.12.2008 № 67. 4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ Определение остаточных количеств Методические
указания 1. Разработаны Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева, Учебно-научным центром «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов» (авторы В.А. Калинин, Т.С. Калинина, Н.В. Устименко). 2. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко. 3. Введены впервые.
4.3. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ Определение
остаточных количеств Пропетамфоса Методические указания 1. Вводная частьФирма производитель: Каллиопе С.А.С. Торговое название: Блотик. Название действующего вещества по ИСО: Пропетамфос. Название действующего вещества по ИЮПАК: Е-О-2-изопропоксикарбонил-1-метилвинил-О-метилэтилфосфорамидотиоат. Структурная формула: Эмпирическая формула: C10H20NO4PS Молекулярная масса: 281,3 Физическое состояние технического продукта - желтоватая маслянистая жидкость. Давление насыщенного пара 1,9 мПа при 20 °С. Температура кипения: 87 - 89 °С. Плотность при 20 °С: 1,1294 г/мл. Коэффициент перераспределения октанол/вода: logKow = 3,82. Растворимость: в воде - 110 мг/л; хорошо смешивается с ацетоном, этанолом, метанолом, гексаном, диэтиловым эфиром, диметилсульфоксидом, хлороформом и ксиленом. Стабилен при хранении и на свету. Гидролитическая стабильность: DT50 11 дней при pH 3; 1 год при pH 6 и 41 день при pH 9. В водной среде не разлагается в течение 70 ч. рКа 13.67. В почве сохраняется в течение 2 - 3 месяцев. Краткая токсикологическая характеристика: Пропетамфос относится к веществам, опасным по острой пероральной (ЛД50 крысы - 59,5 - 119,0 мг/кг) и ингаляционной токсичности (ЛД50 крысы - 4 ч - 690 - 1500 мг/м3), но умеренно опасным по дермальной (ЛД50 крысы - 2260 - 2850 мг/кг). В России гигиенические нормативы не установлены. Область применения препарата. Пропетамфос - инсектицид контактного и кишечного действия из группы органических соединений фосфора с длительным защитным эффектом. Он эффективно подавляет развитие синантропных насекомых (тараканы, мухи, моли, муравьи, комары) и эктопаразитов животных (личинки оводов, клещи и др.). Проходит регистрационные испытания в России и странах СНГ под торговым названием Блотик для применения в качестве ветеринарного препарата. 2. Методика определения Пропетамфоса в молоке и мясе методом газожидкостной хроматографии2.1. Основные положения 2.1.1. Принцип метода Методика основана на определении Пропетамфоса методом газожидкостной хроматографии с использованием термоионного детектора на фосфор после экстракции из анализируемой пробы ацетоном, очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися растворителями и/или на колонке с силикагелем. Идентификация проводится по времени удерживания. Количественное определение - методом абсолютной калибровки. 2.1.2. Метрологическая характеристика метода Метрологическая характеристика метода представлена в табл. 1.
2.1.3. Избирательность метода В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых в ветеринарии. 2.2. Реактивы, материалы, приборы, оборудование 2.2.1. Реактивы, растворы и материалы
2.2.2. Посуда и оборудование
2.3. Отбор проб Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» (№ 2051-79 от 21.08.79), утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР. Пробы воды и масла хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре 4 °С; пробы яблок, зеленой массы рапса, а также клубней картофеля в полиэтиленовой таре - в морозильнике при температуре -18 °С; пробы зерна, семян рапса в бумажных или тканевых мешочках - в сухом, хорошо проветриваемом шкафу, недоступном для грызунов. 2.4. Подготовка к определению 2.4.1. Приготовление стандартных растворов Основной стандартный раствор Пропетамфоса с концентрацией 100 мкг/мл готовят растворением 0,0010 г вещества в мерной колбе на 100 мл в этилацетате. Раствор хранится при комнатной температуре в течение 10 дней. Рабочие стандартные растворы Пропетамфоса с концентрацией 0,05; 0,1; 0,25 и 0,50 мкг/мл готовят из раствора, содержащего 100 мкг/мл вещества, соответствующим последовательным разбавлением этилацетатом. Растворы хранятся при комнатной температуре в течение 10 дней. 2.4.2. Построение градуировочного графика В испаритель хроматографа вводят по 1 мкл рабочего стандартного раствора Пропетамфоса с концентрацией 0,05; 0,1; 0,25 и 0,50 мкг/мл. Строят градуировочный график зависимости высоты хроматографического пика (мм) от содержания Пропетамфоса в хроматографическом объеме (нг). 2.4.3. Приготовление колонки Суспензию 5 г безводного сульфата натрия в 20 мл гексана заливают в колонку с уложенной на дне ватой. После оседания сульфата натрия добавляют в колонку 6 г силикагеля и 5 г сульфата натрия. Промывают колонку 20 мл гексана, не допуская осушения верхнего слоя сорбента. 2.5. Проведение определения 2.5.1. Молоко. Навеску молока 50 г интенсивно перемешивают в стакане на гомогенизаторе или высокоскоростной мешалке с 200 мл ацетона в течение 3 мин или встряхивают в течение 30 мин. Экстракт переносят в центрифужный стакан и центрифугируют в течение 5 мин при 3000 об./мин. Супернатант переносят в концентратор. Осадок в стакане экстрагируют путем встряхивания с 50 мл ацетона. Экстракты объединяют в концентраторе и упаривают ацетон. Оставшуюся жидкость переносят в делительную воронку и экстрагируют Пропетамфос гексаном три раза по 20 мл. Гексановую фракцию пропускают через безводный серно-кислый натрий и упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре не выше 40 °С. Сухой остаток растворяют в 5 - 10 мл этилацетата и аликвоту 3 - 5 мкл хроматографируют. 2.5.2. Мясо. Навеску измельченного на мясорубке мяса 20 - 100 г помещают в стакан гомогенизатора, добавляют 20 г целита 545 и 200 мл ацетона и гомогенизируют при максимальной скорости в течение 3 мин. Переносят экстракт на воронку Бюхнера с бумажным фильтром и фильтруют под вакуумом. Остаток на фильтре возвращают в стакан гомогенизатора, добавляют 150 мл ацетона и гомогенизируют еще 2 мин. Встряхивают дополнительно субстрат на механическом встряхивателе 30 мин и фильтруют экстракт через воронку Бюхнера. Экстракты объединяют и упаривают ацетон на ротационном испарителе при t° = 40 °С. Остаток в концентраторе переносят 100 мл петролейного эфира в делительную воронку объемом 250 мл. Обмывают концентратор двумя порциями по 25 мл ацетонитрила, содержащего 5 % воды. Смыв переносят в делительную воронку. Встряхивают воронку 30 мин, дают жидкостям расслоиться и нижнюю фракцию сливают в концентратор. Повторяют экстракцию ацетонитрилом еще 3 раза (50 + 50 + 50 мл). Ацетонитрильные экстракты объединяют и упаривают досуха на ротационном испарителе при t° = 40 °С. Растворяют остаток в 10 мл н-гексана и переносят на заранее подготовленную колонку с силикагелем. Обмывают концентратор дважды 15 мл н-гексана, перенося гексановый экстракт на колонку. Гексановые экстракты, прошедшие через колонку, отбрасывают. Элюируют Пропетамфос из колонки 80 мл смеси толуола с диэтиловым эфиром (75:25). Элюат из колонки собирают и упаривают досуха при t° = 40 °С. Остаток растворяют в 10 мл толуола или этилацетата и хроматографируют, вводя в хроматограф 2 - 5 мкл раствора. 2.6. Условия хроматографирования и обработка результатов 2.6.1. Условия хроматографирования Газовый хроматограф «Цвет-550» или «Цвет-600» с термоионным детектором. Неподвижная фаза: Инертон-супер с 3 % OV-17 (0,16 - 0,20 мм). Колонка стеклянная длиной 2 м, внутренним диаметром 3 мм. Температура термостата колонки - 200 °С; испарителя - 240 °С; детектора - 340 °С. Скорость газа-носителя (азота) - 50 мл/мин. Скорость водорода - 17 мл/мин. Скорость воздуха - 200 мл/мин. Показания аттенюатора - 16×109 Ом. Скорость движения диаграммной ленты - 240 мм/ч. Хроматографируемый объем - 1 - 5 мкл. Абсолютное время удерживания - 2 мин 27 с. Линейный диапазон детектирования - 0,05 - 0,5 нг. Пробы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,5 мкг/мл, разбавляют этилацетатом или толуолом. Альтернативная хроматографическая фаза: Инертон-супер с 5 % ХЕ-60 (0,16 - 0,20 мм). Колонка стеклянная длиной 2 м, внутренним диаметром 2 мм. Температура термостата колонки - 180 °С. испарителя - 250 °С; детектора или переходной камеры - 360 °С. Скорость газа-носителя (азота) - 35 мл/мин. Скорость водорода - 11 мл/мин. Скорость воздуха - 140 мл/мин. Показание аттенюатора - 16×109. Хроматографируемый объем - 1 - 5 мкл. Абсолютное время удерживания - 3 мин 45 с. Линейный диапазон детектирования - 0,05 - 0,5 нг. Пробы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 1,0 мкг/мл, разбавляют этилацетатом. 2.6.2. Обработка результатов анализа Содержание Пропетамфоса в пробах молока и мяса рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:
X - содержание Пропетамофоса в пробе, мг/кг; Н1 - высота пика в образце, мм; Н0 - высота пика Пропетамфоса в стандарте, мм; А - концентрация стандартного раствора, мкг/мл; V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл; m - масса или объем анализируемого образца, г или мл; Р - содержание Пропетамфоса в аналитическом стандарте. 3. Требования техники безопасностиНеобходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами. Содержание
|